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背景:扩张型心肌病是一种以左或右心室或双侧心室进行性扩大,心室收缩功能减退为主要特征的心肌疾病,主要表现为心力衰竭、心律失常、栓塞等,病死率高。其发生发展核心的病理过程是心室重塑,心室重塑重要的病理变化是心肌纤维化。中医药对心肌纤维化的治疗有独特的优势,黄芪保心汤是本课题组研制的治疗扩张型心肌病的方剂,前期临床和基础实验研究表明黄芪保心汤可以改善扩张型心肌病患者和大鼠心功能及相关指标。本课题在前期研究基础上,研究黄芪保心汤对扩张型心肌病大鼠心肌纤维化和TGF-β/smad通路的影响。目的:1.体内试验研究黄芪保心汤对扩张型心肌病大鼠心功能及心肌纤维化的影响,并初步探讨对TGF-β/smad通路的影响。2.体外实验研究黄芪保心汤中有效成分丹酚酸B对心肌成纤维细胞增殖和胶原含量的影响,并初步探讨对TGF-β/smad通路的影响。方法:1.体内试验:选取SD大鼠80只,分为两组:空白对照组和模型组,模型组采用腹腔注射盐酸多柔比星的方法构建扩张型心肌病心衰大鼠模型。心脏彩超筛选出扩张型心肌病心衰造模成功的大鼠,再分为5组:模型组,黄芪保心汤低剂量组;黄芪保心汤中剂量组,黄芪保心汤高剂量组,卡托普利组。给药4周后再次行心脏彩超测量大鼠左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS),酶联免疫法检测大鼠血清PICP、PⅢNP的含量,苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察心肌形态和心肌胶原容积分数(CVF),实时荧光定量PCR检测心肌组织 Galectin-3、CollogenⅠ、CollogenⅢmRNA 和免疫组化(IHC)检测 CollogenⅠ、Collogen Ⅲ,Western blot 检测心肌组织 Galectin-3、TGF-β1、smad3 蛋白表达的水平。2.体外试验:采用血管紧张素Ⅱ诱导原代心肌成纤维细胞,共分为空白对照组、血管紧张素Ⅱ组,丹酚酸B低剂景组,丹酚酸B中剂量组,丹酚酸B高剂量组,缬沙坦阳性药物组。应用CCK8法检测心肌成纤维细胞的增殖情况,免疫荧光法检测细胞Galectin-3表达,实时荧光定量PCR检测心肌成纤维细胞Collogen Ⅰ、Collogen Ⅲ mRNA和Western Blot检测细胞Galectin-3、TGF-β1和smad3蛋白表达的水平。结果:1.体内试验:大鼠心脏彩超提示黄芪保心汤各剂量组,卡托普利组较模型组LVESD、LVEDD、LVEF、LVFS均有显著差异(P<0.05),血清PICP、PⅢNP水平均有降低(P<0.05),心肌组织病理学染色提示黄芪保心汤各剂量组,卡托普利组较模型组心肌纤维化程度减轻,CVF有不同程度降低(P<0.05),CollogenⅠ、CollogenⅢmRNA表达不同程度降低(P<0.05),Galectin-3、TGF-β、smad3蛋白表达降低,具有统计学差异(P<0.05)。2.体外试验:丹酚酸B各剂量组,缬沙坦组与模型组比较,细胞增殖率均有所下降,具有显著差异(P<0.05),免疫荧光结果提示成纤维细胞Galectin-3表达水平均有降低(P<0.05),CollogenⅠ、CollogenⅢmRNA 表达不同程度降低(P<0.05),Galectin-3、TGF-β、smad3蛋白表达水平降低,具有统计学差异(P<0.05)。结论:黄芪保心汤可以改善扩张型心肌病大鼠心功能及心肌纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β/smad通路有关。丹酚酸B可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成,其作用机制也可能与抑制TGF-β/smad通路有关。