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目的:本实验以家兔为研究对象,建立家兔实验性蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage SAH)模型,在SAH早期以盐酸法舒地尔静注,通过观察对比家兔生活习性及神经功能活动的变化、基底动脉管径及管壁变化、检测基底动脉中Rho激酶(Rho kinase)和eNOS的表达情况,阐述SAH后应用法舒地尔与脑血管痉挛(Cerebral vasospasm CVS)的发生、发展的关系,为临床上SAH患者提供更加合理、有效的治疗策略,提高CVS患者预后质量。 方法:选取12周龄、雄性、体重在2.5~3kg左右全白色家兔95只(5只行预实验),将90只家兔随机分为对照组(Control-C组)30只、SAH(S组)组30只和法舒地尔(Fasudil-F组)组30只,每组内随机分成6h、3d、5d、7d及10d5个亚组,每亚组6只。C组及F组家兔采用二次注血法建立家兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型,以造模后家兔出现性情改变(烦躁、嗜睡、懒动)、神经功能障碍(颈强直、划圈)且无呼吸心跳异常及死亡者为造模成功标准。记录各组家兔在实验进程中生活习性及神经功能活动的变化。在各个时间点处死家兔,3只深麻后灌注,HE染色观察基底动脉的形态,测量管径,免疫组化法测定基底动脉eNOS的表达;3只深麻后快速解剖取脑,western blot测定基底动脉Rho kinase的活性。通过家兔神经功能变化、管径改变及各项化验指标对比,研究法舒地尔对家兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响。 结果:1.造模后家兔解剖取脑见脑干基底动脉周围有大量血凝块凝集(3d组明显),模型可靠;2.S组家兔造模后较C组发生明显性情改变和神经功能活动障碍,具体表现为食欲下降,嗜睡,活动能力下降等,而F组变化程度优于S组,评分结果差异明显(p<0.05);3.光镜下S组家兔基底动脉管腔变窄、管壁变厚、内膜皱缩,而F组上述变化程度轻于S组,3d及5d组对比有明显统计学意义(p<0.05);4.免疫组化检测F组基底动脉eNOS荧光密度明显多于S组,3d及5d组对比有明显统计学意义(p<0.05);5.S组基底动脉经western blot检测Rho kinase的活性在造模后明显上升,并于第3天达峰值,F组Rho kinase表达明显少于S组,3d及5d组对比有明显统计学意义(p<0.05); 结论:1.本实验中采用枕大池二次注血法成功建立家兔SAH模型,能够模拟SAH后CVS的发展过程;2.SAH后家兔饮食、活动等变化明显,基底动脉管径会明显收缩,内膜增厚、皱缩。3.SAH可导致基底动脉中Rho kinase的表达升高,其表达活性与CVS的程度密切相关。4.法舒地尔作为Rho kinase抑制剂,在减轻SAH后的CVS方面效果显著,其机制可能是由于增加了动脉管壁上eNOS的表达活性。