【摘 要】
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基于工程已经日益成为获得优质、高产、多抗的优良品种的有效手段之一.为充分满足生产及理论研究的需要,人们迫切需要获得更多新的植物抗性基因,如介导HR反应的R基因和编码能
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基于工程已经日益成为获得优质、高产、多抗的优良品种的有效手段之一.为充分满足生产及理论研究的需要,人们迫切需要获得更多新的植物抗性基因,如介导HR反应的R基因和编码能够直接抑制病原生长活性蛋白的基因,如胰蛋白酶抑制剂基因等.通过筛选水稻核库,研究人员克隆到新的水稻胰蛋白酶抑制剂基因,并利用核苷酸结合位点的同源性,进行了水稻R基因RNP5的克隆工作.在已经克隆到的植物抗真菌、细菌和病毒害的15个基因中,广泛存在着一些高度保守的同源序列.如蛋白激酶结构,核苷酸结合位点(NBS)结构以及富亮氨酸重复区(LRR).通过对这些同源序列片断的克隆和研究,为迅速克隆植物其他的抗病基因提供了可能.根据已知R基因NBS区保守结构的氨基酸序列,研究人员设计了一对简并引物,通过PCR扩增从水稻中得到2个与基因保守序列高度同源的片段.分析表明,其中的一个克隆RN15是水稻所特有的,它与Rpml蛋白的相似性为76.2%;而另一个克隆RN18则在玉米、小麦中都有同源的序列存在,它与Rps2蛋白的相似性为68.8%.用RN18作探针从水稻BAC库中筛选到阳性克隆,已获得的基因片段表明,它是一个新的NBS-LRR家族的成员,这说明这种利用保守的同源序列来快速克隆植物中R基因的方法是行之有效的.
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