天麻和沙枣两种植物多糖的分离纯化及其生物学活性研究

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近年来,随着对多糖研究的不断深入,人们了解到多糖不仅仅是生物体的结构材料或能量储备物质,还是生物体内一类重要的信息分子,并具有多种生理功能活性。因此,具有生物活性的多糖现已成为国内外众多学科领域的热点之一。本论文对天麻和沙枣两种植物多糖进行提取分离,并对纯化后的均一组分多糖进行理化性质检测和生物学活性研究。本论文分以下两部分:一、天麻多糖的研究:天麻(Gastrodia el Bl.)是我国传统的名贵药材,古代医书记载了许多天麻的神奇药效,其最早记录于东汉末年的《神农本草经》:“杀鬼精物,蛊毒恶气,久服益气力,长阴肥健”,表明了天麻可医治头晕目眩、小儿惊风、神经疼痛等功效。多糖是天然的高分子化合物,参与并维持了生命的多种生理功能。本论文试验旨在对天麻多糖的分离纯化及生物学活性进行初步研究,为今后天麻多糖的利用和开发提供一定的依据。试验以天麻为材料,对天麻多糖的提取分离及生物学活性进行研究。试验结果如下:1、本试验采用水提醇沉法得到天麻粗多糖,并对粗多糖进行脱蛋白及透析处理,得到精制天麻多糖。随后利用DEAE-52和Sephadex G-100对精制多糖进行纯化获得两个均一组分多糖RGP-1a和RGP-1b。2、利用傅里叶红外光谱(FT-IR)、紫外光谱(UV)、高效液相(HPLC)、高效液相排阻色谱(HPGPC)等仪器对RGP-1a和RGP-1b进行初步结构表征。3、DPPH·自由基和·OH自由基清除实验表明,RGP-1a和RGP-1b具有显著的清DPPH·自由基和·OH自由基的能力。同时,体外免疫活性实验表明,RGP-1a和RGP-1b能显着地刺激巨噬细胞释放NO和增强巨噬细胞的吞噬能力。特别是当天麻多糖RGP-1b的浓度为200μg/m L时,其刺激巨噬细胞释放NO和增强巨噬细胞的吞噬能力与阳性对照LPS(2μg/m L)作用能力相当。以上试验数据表明,天麻多糖具有被开发成为保健食品的潜能。二、沙枣多糖的研究:沙枣(Elaeagnus angustifolia L)属胡颓子属多年生植物,主要分布于亚洲喜马拉雅山脉的北部和欧洲地区。在我国,沙枣被广泛用于治疗阿米巴痢疾呕吐、黄疸病、哮喘、肠胃气胀、类风湿性关节炎炎症等。本研究主要对沙枣多糖的提取工艺进行了优化,并对均一组分多糖进行了理化性质检测和体外免疫活性研究。试验结果如下:1、以单因素试验为基础,利用响应面优化法对超声波提取多糖工艺进行了优化。建立了最优的沙枣多糖提取工艺参数:提取时间43 min、提取温度79℃、超声波功率282 W和料液比为1:30,在此条件下预测沙枣多糖的得率为9.93±0.24%。2、沙枣粗多糖经过DEAE-52纤维素和Sephadex G-100柱层析分离纯化得到两个均一组分多糖EAP-1a和EAP-1b。并利用傅里叶红外光谱(FT-IR)、紫外光谱(UV)、高效液相(HPLC)、高效液相排阻色谱(HPGPC)等仪器对RGP-1a和RGP-1b进行初步结构表征。3、体外免疫活性实验表明,EAP、EAP-1a和EAP-1b均具有刺激巨噬细胞释放NO的能力,并且能促进其吞噬能力。以上研究表明沙枣多糖在药物和功能食品领域具有广阔的前景。然而,关于沙枣多糖的结构与生物活性的机制还需要进一步研究。
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