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目的:通过观察雷公藤多甙(GTW)致卵巢储备功能下降(DOR)大鼠免疫细胞因子白细胞介素-2(IL-2)的水平和卵巢肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,进一步探讨补肾活血方改善卵巢储备功能的作用机制,为临床治疗DOR提供科学依据。方法:选取SD雌性健康大鼠48只,根据体重随机分为6组(n=8):空白对照组(灌胃同体积的生理盐水)、GTW模型组(GTW50mg/kg/d)、六味地黄汤组(GTW50mg+六味地黄汤7.50g生药/kg/d)、补肾活血方低剂量组(GTW50mg+补肾活血方3.25g生药/kg/d)、补肾活血方中剂量组(GTW50mg+补肾活血方7.50g生药/kg/d)、补肾活血方高剂量组(GTW50mg+补肾活血方15.00g生药/kg/d)。连续15天灌胃给药,给药结束后1-4日内结合阴道细胞学涂片,将未出现明显动情周期的大鼠乙醚麻醉,予股动脉取血后颈椎脱臼处死,并立刻摘取大鼠双侧卵巢。观察各组大鼠动情周期、体重、卵巢质量、卵巢系数;采用放射免疫法检测大鼠血清中FSH、E2的变化;采用放射免疫法检测大鼠血清中免疫细胞因子IL-2的变化;HE染色检测大鼠卵巢组织形态学的改变;免疫组化法检测大鼠卵巢组织TNF-α水平的表达。结果:(1)模型组大鼠卵巢质量及卵巢系数较空白对照组降低;模型组大鼠血清中FSH明显高升,E2明显下降,与空白对照组比较均有显著差异(P值均为p<0.001);模型组大鼠血清中免疫细胞因子IL-2下降,与空白对照组比较均有显著差异(p<0.01);模型组大鼠卵巢组织中各期卵泡数均明显减少,卵泡间质内有不同程度的炎细胞浸润及纤维化;模型大鼠TNF-α呈低表达与空白对照组有显著差异(p<0.05)。(2)补肾活血方低、中、高剂量组与六味地黄汤组均可不同程度改善GTW大鼠的卵巢质量及卵巢系数;均能明显降低GTW大鼠血清FSH水平,与模型组比较均有显著差异(p<0.001);补肾活血方中、高剂量组与六味地黄汤组均可升高血清E2水平,与模型组比较均有差异(P值分别为p<0.01、p<0.05、p<0.01);补肾活血方中、高剂量组与六味地黄汤组均可升高血清中免疫细胞因子IL-2水平,与模型组比较均有差异(均为p<0.05);补肾活血方中、高剂量组卵泡颗粒细胞和卵母细胞中的TNF-α表达较模型组改善,存在统计学差异(P<0.05),与空白组比较无明显差异。结论:(1)补肾活血方可降调GTW大鼠血清中FSH水平,上调血清中E2水平,表明补肾活血方可改善卵巢储备功能,上调血清中免疫细胞因子IL-2,拮抗卵巢中卵泡的损伤,升高卵泡颗粒细胞和卵母细胞TNF-α的表达,可能是其防治DOR的又一作用机制之一。(2)补肾活血方(补肾活血法)和六味地黄汤(补肾法)均能改善卵巢储备功能,抑制卵泡的损伤,但补肾活血方在改善卵泡颗粒细胞和卵母细胞TNF-α的表达方面优于六味地黄汤,与前期研究基础一致,反映出补肾活血方可通过多方面作用机制来改善DOR。