补肾活血方调节雷公藤多甙致卵巢储备功能下降大鼠卵巢免疫功能的实验研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:slchen168
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目的:通过观察雷公藤多甙(GTW)致卵巢储备功能下降(DOR)大鼠免疫细胞因子白细胞介素-2(IL-2)的水平和卵巢肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,进一步探讨补肾活血方改善卵巢储备功能的作用机制,为临床治疗DOR提供科学依据。方法:选取SD雌性健康大鼠48只,根据体重随机分为6组(n=8):空白对照组(灌胃同体积的生理盐水)、GTW模型组(GTW50mg/kg/d)、六味地黄汤组(GTW50mg+六味地黄汤7.50g生药/kg/d)、补肾活血方低剂量组(GTW50mg+补肾活血方3.25g生药/kg/d)、补肾活血方中剂量组(GTW50mg+补肾活血方7.50g生药/kg/d)、补肾活血方高剂量组(GTW50mg+补肾活血方15.00g生药/kg/d)。连续15天灌胃给药,给药结束后1-4日内结合阴道细胞学涂片,将未出现明显动情周期的大鼠乙醚麻醉,予股动脉取血后颈椎脱臼处死,并立刻摘取大鼠双侧卵巢。观察各组大鼠动情周期、体重、卵巢质量、卵巢系数;采用放射免疫法检测大鼠血清中FSH、E2的变化;采用放射免疫法检测大鼠血清中免疫细胞因子IL-2的变化;HE染色检测大鼠卵巢组织形态学的改变;免疫组化法检测大鼠卵巢组织TNF-α水平的表达。结果:(1)模型组大鼠卵巢质量及卵巢系数较空白对照组降低;模型组大鼠血清中FSH明显高升,E2明显下降,与空白对照组比较均有显著差异(P值均为p<0.001);模型组大鼠血清中免疫细胞因子IL-2下降,与空白对照组比较均有显著差异(p<0.01);模型组大鼠卵巢组织中各期卵泡数均明显减少,卵泡间质内有不同程度的炎细胞浸润及纤维化;模型大鼠TNF-α呈低表达与空白对照组有显著差异(p<0.05)。(2)补肾活血方低、中、高剂量组与六味地黄汤组均可不同程度改善GTW大鼠的卵巢质量及卵巢系数;均能明显降低GTW大鼠血清FSH水平,与模型组比较均有显著差异(p<0.001);补肾活血方中、高剂量组与六味地黄汤组均可升高血清E2水平,与模型组比较均有差异(P值分别为p<0.01、p<0.05、p<0.01);补肾活血方中、高剂量组与六味地黄汤组均可升高血清中免疫细胞因子IL-2水平,与模型组比较均有差异(均为p<0.05);补肾活血方中、高剂量组卵泡颗粒细胞和卵母细胞中的TNF-α表达较模型组改善,存在统计学差异(P<0.05),与空白组比较无明显差异。结论:(1)补肾活血方可降调GTW大鼠血清中FSH水平,上调血清中E2水平,表明补肾活血方可改善卵巢储备功能,上调血清中免疫细胞因子IL-2,拮抗卵巢中卵泡的损伤,升高卵泡颗粒细胞和卵母细胞TNF-α的表达,可能是其防治DOR的又一作用机制之一。(2)补肾活血方(补肾活血法)和六味地黄汤(补肾法)均能改善卵巢储备功能,抑制卵泡的损伤,但补肾活血方在改善卵泡颗粒细胞和卵母细胞TNF-α的表达方面优于六味地黄汤,与前期研究基础一致,反映出补肾活血方可通过多方面作用机制来改善DOR。
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