目的：神经母细胞瘤来源于原始神经嵴，是一种较常见的婴儿和儿童颅外实体肿瘤，在小儿肿瘤中占到了8～10％，但是有趣的是部分患者可以不治而愈。Runx3最早被归类为Runt相关转录因子，而且近来的研究表明，Runx3在多种肿瘤，包括胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、胆管癌等的发生、发展过程中都表现出了抑癌基因活性。本实验目的旨在验证Runx3基因在神经母细胞瘤中的抑癌活性，对此，我们测定了Runx3及相关基因的表达水平，检测了Runx3基因启动子区域的甲基化状态，并分析了其表达水平与神经母细胞瘤患儿的预后包括生存率之间的关系。　　 方法：采用半定量RT-PCR和实时定量PCR检测110例原发性神经母细胞瘤组织中Runx3、myc-n及其它相关基因的表达水平，结合患者的年龄、临床分期、肿瘤来源、myc-n扩增、Trk-A表达、DNA指数、染色体1p36杂合子缺失等临床资料进行相关分析，并用myc-n诱导系统来检测Runx3与myc-n表达水平之间的关系。通过CGH芯片检测染色体1p36的缺失状态与Runx3表达的关系。甲基化PCR（Methylation Specific PCR，MSP）被用来检测神经母细胞瘤细胞系中Runx3基因启动子区域的甲基化状态，从而验证是否DNA甲基化在Runx3的转录调节中发挥重要作用。　　 统计分析使用Fisher’s确切概率法。p<0.05为检验水准。　　 结果：　　 1.Runx3在预后良好的神经母细胞瘤组中高表达，而在预后不良组中表达较低。　　 2.Runx3高表达组（n=22）神经母细胞瘤患者8年生存率约为84％，低表达组（n=88）神经母细胞瘤患者8年生存率约为43％。两组比较有显著差异（p=0.02，n=110）。在Runx3高表达组（n=22）中，INSS分期为1+2+3期的无肿瘤转移神经母细胞瘤患者19例，有肿瘤转移的4+4s期神经母细胞瘤患者3例；在Runx3低表达组（n=88）中，无转移患者53例，有转移患者35例。两组比较有显著性差异（p=0.0163）。此外，在Runx3高表达组（n=22）中，myc-n单倍体神经母细胞瘤患者20例，多倍体患者2例；在Runx3低表达组（n=88）中，myc-n单倍体神经母细胞瘤患者63例，多倍体患者25例；两组比较有显著差异（p=0.0472）。而Runx3表达水平与其它神经母细胞瘤预后指标，如：年龄、肿瘤原发部位、Shimada病理分类、Trk-A表达以及DNA倍数等均无统计学差异。　　 3.Runx3的高表达与神经母细胞瘤患者的高生存率明显相关（p=0.02）。　　 4.在58例二倍体神经母细胞瘤中，有12例显示在1号染色体上有36等位基因缺失。伴有1p36缺失的样品中Runx3表达的平均值为0.16+/-0.07（n=12），不伴有1p36缺失的样品中Runx3表达的平均值为0.83+/-0.21（n=47），两者比较有显著差异（P=0.0195）。　　 5.单倍体myc-n神经母细胞瘤患者（n=83）8年生存率约为75％，myc-n扩增患神经母细胞瘤患者（n=27）8年生存率约为22％。两组比较有显著差异，p<0.01。INSS低分期的神经母细胞瘤往往伴有Runx3的高表达，而4期肿瘤伴有明显的低表达及myc-n的高表达。在myc-n高表达组中，同时伴有Runx3高表达的患者生存率较高，而伴有低表达的病人生存率低。而且myc-n的过表达可以下调Runx3的表达水平。　　 6.23个神经母细胞瘤细胞系中，Runx3高表达组（n=11）甲基化细胞系3个，未甲基化细胞系8个；低表达组（n=12）中甲基化细胞系4个，未甲基化细胞系8个。两组比较，p=0.555，无显著性差异。　　 7.瞬时转染实验结果显示表达Runx3的神经细胞生长出许多突触，只表达GFP的细胞则没有生长。结果表明Runx3高表达促进了神经细胞的分化　　 结论：　　 1.Runx3高表达与神经母细胞瘤患者的良好预后密切相关，表现出了肿瘤抑制基因的活性，是神经母细胞瘤中的一个新的抑癌基因。　　 2.神经母细胞瘤中染色体1p36的缺失是造成Runx3基因低表达的主要原因之一。　　 3.myc-n过表达可以负向调节Runx3表达，并降低患者生存率。然而，如果myc-n和Runx3同时高表达，患者可以具有良好的预后，即Runx3可以拮抗myc-n对神经母细胞瘤发生发展的促进作用。　　 4.Runx3启动子区域的甲基化状态与Runx3基因表达水平无关，甲基化不是造成Runx3表达降低的一个主要原因。　　 5.Runx3过表达可以诱导神经细胞的分化，促进神经母细胞瘤细胞的凋亡，是患者良好的预后的重要因素。