【摘 要】
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本文以产胆固醇氧化酶(EC1.1.3.6)红色短杆菌DGCCN-R为研究对象,以提高胆固醇氧化酶(COD)生成水平为目的,研究了这株红色菌株产COD和产色素的关系,试图利用这种相关性,创立一
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本文以产胆固醇氧化酶(EC1.1.3.6)红色短杆菌DGCCN-R为研究对象,以提高胆固醇氧化酶(COD)生成水平为目的,研究了这株红色菌株产COD和产色素的关系,试图利用这种相关性,创立一种理性、简易、可行的COD高产株筛子。遗传稳定性实验观察表明,红色菌株DGCCN-R转接8代之后,仍然保持高产COD和产红色素的性质,未观察到自发的回复突变,说明其产酶和产红色素具有遗传稳定性。经生理生化测试和16S rDNA测序鉴定,我们暂定此菌株名为红色短杆菌。研究了红色菌株DGCCN-R产COD与红色素,以及红色素与发酵液中底物胆固醇、胆固醇代谢产物胆甾-4-烯-3-酮的关系。发现菌株DGCCN-R产COD与产色素成正偶联关系。以超声波联合亚硝基胍的复合诱变方法,对红色菌株DGCCN-R进行了诱变处理,得到两株突变株DGCCN-W和DGCCN-P,DGCCN-W为白色菌落,DGCCN-P为淡粉色菌落。这两株变异株在菌落颜色变淡的同时,产酶能力也相应下降,说明出发菌株DGCCN-R本身产COD和产红色素存在着偶联关系。通过对培养基中主要碳、氮源,培养温度、通气量,以及培养基中添加金属离子的优化,分析了产酶和色素色价的关系。结果表明这些因素对菌株产酶和产色素的影响基本一致,从发酵水平说明菌株DGCCN-R产酶和产色素成正偶联关系。对菌种所产色素进行了分离提取,分析了色素与产酶在代谢上的关系。HPLC、UV、MS等仪器分析结果以及抑制剂实验表明,菌种产生的红色素为一类类胡罗卜素。
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