目的：肿瘤已成为当今世界危及人类生命的一种最常见，最严重的疾病。化疗是临床治疗癌症的主要方法，然而大多数抗肿瘤西药对癌细胞和人体正常细胞的选择性差别不大，导致在治疗过程中人体不良反应严重且广泛存在，使得众多患者不能耐受化疗。不同肿瘤对药物的敏感性不同和易产生耐药性，也使肿瘤化疗的疗效受到一定的限制。　　 近年来，植物来源的抗肿瘤药物重新获得重视，不仅为发现新的抗肿瘤药物提供广阔领域，也可为设计制备更理想的新药提供独特的化学结构，并促进肿瘤治疗理论创新和发展。本课题旨在建立PHPLC法大规模制备荭草苷、牡荆苷纯品，探讨黄酮碳苷单体荭草苷、牡荆苷抗肿瘤作用，为抗肿瘤药物筛选及抗肿瘤药物构效关系的研究提供实验依据。　　 第一部分、金莲花中荭草苷、牡荆苷的提取分离　　 方法：　　 1.建立HPLC、PHPLC测定荭草苷、牡荆苷的分析分离方法。HPLC:采用Hypersil BDS C18（4.6×150mm，5μm），流动相为乙腈-1％乙酸(15：85)，流速为1.0ml·min-l，柱温30℃，检测波长340nm;PHPLC:采用ZORBAX SB-C18:（21.2mm×250mm，7μm），流动相为乙腈-1％乙酸(15：85)，柱温：25℃，流速：20ml·min-l，检测波长：340nm，进样量：6ml，馏分收集：基于峰，阈值Min:2.2。　　 2.金莲花总黄酮的提取纯化：(1)金莲花用丙酮回流提取除去色素，将干燥后的滤渣用70％乙醇于80℃水浴回流提取1.5h，提取两次，合并滤液并回收乙醇至无醇味，离心浓缩液，收集上清液，即得总黄酮提取液。(2)黄酮浓缩液300ml加到大孔树脂柱上，静止吸附约20min。用4倍柱体积蒸馏水和70％乙醇洗脱。HPLC随时检测洗脱液中荭草苷、牡荆苷，收集70％乙醇洗脱液。洗脱液经乙酸乙酯萃取，浓缩蒸干成固体。　　 3.金莲花荭草苷牡荆苷分离纯化及鉴定：　　 (1)将上述蒸干的总黄酮固体用流动相超声溶解，过0.45μm有机微孔滤膜，制备型高效液相色谱进样，分别收集荭草苷、牡荆苷馏分，低温冷冻干燥即得荭草苷、牡荆苷单体。　　 (2)采用高效液相色谱法（HPLC）测定样品中荭草苷、牡荆苷含量，用荭草苷、牡荆苷标准品作对比，1H-NMR鉴定制备的荭草苷、牡荆苷样品结构。　　 结果：在所建立的HPLC条件下，测定分离得到的荭草苷、牡荆苷单体纯度为98％以上，1H-NMR鉴定制备所得荭草苷、牡荆苷单体与标准品图谱一致。　　 结论：本实验所建立的制备型色谱分离荭草苷、牡荆苷单体的方法，操作简便，重复性好，分离得到的荭草苷、牡荆苷单体可作为定性、定量分析使用的对照品，同时可用于抗肿瘤作用的研究。　　 第二部分、金莲花中荭草苷、牡荆苷的抗肿瘤作用　　 方法：　　 1.以人食管癌EC-109细胞为研究对象，研究金莲花荭草苷、牡荆苷体外抗肿瘤作用及其效果。用不同浓度荭草苷、牡荆苷作用于对数生长期的EC-109细胞，通过CCK-8法检验其对EC-109细胞体外生长、增殖的抑制作用。　　 2.通过凋亡试剂盒Hoechest33258荧光染色形态观察、琼脂糖凝胶电泳检测DNA Ladder、Annexin V-FITC/PI-FCM，检验荭草苷牡荆苷诱导EC-109细胞凋亡情况。　　 结果：荭草苷、牡荆苷对EC-109细胞体外生长、增殖具有明显的抑制作用，均能够诱导EC-109细胞凋亡。作用随着药物浓度的增高而增加、随着作用时间的延长而显著增高。相同的物质量摩尔浓度进行比较，抑制EC-109细胞增殖及诱导凋亡的效果，荭草苷的作用强于牡荆苷。　　 结论：荭草苷和牡荆苷均具有较好的抗EC-109食管癌细胞作用，这为黄酮碳苷类化合物抗肿瘤研究提供了实验依据，为开发新的抗肿瘤药物、探讨其在食管癌治疗中的可能性，打下基础。