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目的:大熊猫源于中国,是世界上最稀有和受到最大生存威胁的哺乳动物之一。随着人类生存地域的扩张,大熊猫的栖息地环境被破坏,对大熊猫圈养成为保护大熊猫和提高其繁殖率的必要措施。微生物是许多直接或间接影响动物繁殖及相关疾病的原因。真菌作为阴道中微生物的重要组成,时常引发如念珠菌性阴道炎等疾病,也引起动物流产、死胎等繁殖障碍。阴道内真菌存在状况越来越引起人们的关注和研究。为了科学保护大熊猫,提高大熊猫的繁殖率,弄清发情期大熊猫阴道内可培养真菌的种类及对药物的敏感性,为大熊猫的生殖道合理用药提供参考。方法:通过对成都大熊猫繁育研究基地的10只发情期雌性大熊猫(成绩、北川、蜀兰、庆贺、娅仔、晶晶、大娇、萌萌、娅双、小丫头)阴道分泌物进行真菌分离培养、形态学鉴定;通过真菌ITS序列通用引物ITS1、ITS4对分离真菌进行PCR扩增、序列测定,再在NCBI BLAST比对其ITS序列基因相似性,提交其序列。并对各真菌进行分析,找出对大熊猫阴道健康或生殖有威胁菌种。选取5种抗真菌药(两性霉素B、制霉菌素、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑)通过丹麦Rosco纸片扩散法对大熊猫发情期阴道分泌物中分离到的5种酵母菌:链状假丝酵母菌(Candida catenulata)、担子菌类酵母菌(Pseudozyma aphidis)、季也蒙毕赤氏酵母菌(Pichia guilliermondii)、汉氏德巴利氏酵母菌(Debaryomyces hansenii)、皮状丝孢酵母菌(Trichosporon cutaneum)进行药敏试验。结果:本次试验共分离到30种不同真菌,包含25种霉菌,5种酵母菌。10只大熊猫中有4只(40%)均有青霉属(Penicillium spp.),2(20%)只有曲霉属(Aspergillus spp.),3只(30%)有杂色曲霉(Aspergillus versicolor),3只(30%)有枝孢样枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)。5种酵母菌均对两性霉素B、制霉菌素敏感;Trichosporon cutaneum对酮康唑、伊曲康唑中度敏感,Debaryomyces hansenii对伊曲康唑中度敏感,Candida catenulata对氟康唑中度敏感,对酮康唑、伊曲康唑耐药。结论:试验结果表明发情期大熊猫阴道可培养真菌种类主要为霉菌(83.33%),酵母菌较少(16.67%)。Penicillium spp.、Aspergillus spp(特别是Aspergillus versicolor)及Cladosporium cladosporioides可能是熊猫阴道中的定殖菌种;6种霉菌:球毛壳菌(Chaetomium globosum)、杂色曲霉(Aspergillus versicolor)、互隔交链孢霉(Alternaria alternata)、枝孢样枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)、马尔尼菲青霉(Penicilliummarneffe).层生镰刀霉(Fusarium proliferatum)和1种酵母菌:链状假丝酵母菌(C.catenulata)可能对大熊猫健康或繁殖存在威胁。两性霉素B和制霉菌素是临床治疗由本研究中5种酵母菌引起的大熊猫阴道疾病的首选药。