【摘 要】
：
第一部分 saRNA激活肾癌细胞E-cadherin基因表达及其机制目的:检测肾癌细胞中的E-cadherin基因表达,观察E-cadherin表达水平与肾癌发生的相关性。遴选能和E-cadherin基因启动子区域序列互补的saRNAs,明确saRNA对肾癌细胞系ACHN和786-O细胞E-cadherin表达的激活效应。材料与方法:收集2016年8月2016年11月期间于瑞金医院泌尿外科手术并经
论文部分内容阅读
第一部分 saRNA激活肾癌细胞E-cadherin基因表达及其机制目的:检测肾癌细胞中的E-cadherin基因表达,观察E-cadherin表达水平与肾癌发生的相关性。遴选能和E-cadherin基因启动子区域序列互补的saRNAs,明确saRNA对肾癌细胞系ACHN和786-O细胞E-cadherin表达的激活效应。材料与方法:收集2016年8月2016年11月期间于瑞金医院泌尿外科手术并经病理确诊的15对“肾细胞癌”的癌组织及癌旁正常肾组织,采用免疫组化的方法了解石蜡切片中肾癌标本中E-cadherin表达;应用实时荧光定量PCR和Westernblot检测15对临床肾细胞癌组织和癌旁正常肾组织中E-cadherin基因的mRNA和蛋白表达水平;生物合成的dsControl,dsEad-215,siEcad+dsEcad-215（其中dsControl为阴性对照组,dsEad-215为实验组,siEcad+dsEcad-215为干扰组）通过脂质体转染肾癌细胞系ACHN和786-O细胞,72小时后采用实时荧光定量PCR和Westernblot分别检测两株肾癌细胞的E-cadherin mRNA和蛋白表达水平并和正常对照组比较。结果:免疫组化结果表明,肾癌组织中E-cadherin蛋白的表达显著低于癌旁正常肾组织;实时荧光定量PCR提示,肾癌组织中E-cadherin在mRNA水平的表达也显著低于癌旁正常肾组织,差异具有统计学意义（P<0.05）。ACHN和786-O肾癌细胞株在转染后72小时,实时荧光定量PCR和Westernblot显示与Mock和dsControl相比,dsEad-215能显著诱导E-cadherin mRNA和蛋白表达。结论:E-cadherin在人肾癌组织中呈低表达,在肾癌组织中E-cadherin mRNA表达水平较正常肾细胞低;saRNAs能通过与E-cadherin基因启动子结合而激活肾癌细胞系ACHN和786-O细胞的E-cadherin表达。第二部分 saRNA通过激活E-cadherin基因表达对肾癌细胞转移和侵袭的抑制作用目的:探讨saRNA通过激活E-cadherin表达对肾癌细胞系ACHN和786-O的细胞迁移和侵袭的影响。材料与方法:脂质体转染dsControl,dsEad-215,siEcad+dsEcad-215到肾癌ACHN和786-O细胞。在转染后72小时,Transwell迁移、侵袭实验和划痕实验法检测肾癌细胞的迁移和侵袭能力。结果:在肾癌细胞ACHN和786-O中,与空白对照Mock组和阴性对照dsControl转染组相比,转染dsEad-215后72小时,通过Transwell迁移和侵袭实验证实,dsEad-215较Mock和dsControl能显著抑制ACHN和786-O细胞的迁移和侵袭能力（P<0.05）,通过划痕实验也再次证实,dsEad-215较Mock和dsControl能显著抑制ACHN和786-O细胞的迁移能力（P<0.05）。结论:saRNA dsEad-215通过激活E-cadherin基因的表达而抑制肾癌细胞转移和侵袭的能力。
其他文献
目的:下尿路功能障碍（LUTD）是脊髓损伤（SCI）后常见的并发症也是其患者最主要的死因。本论文旨在研究神经生长因子（NGF）与5-羟色胺7（5-HT7）受体在SCI后LUTD（感觉与运动）中的作用,并探索其可能机制。方法:第一部分,首先通过功能学、组织学实验比较SCI小鼠与正常小鼠膀胱功能与形态的改变。之后给与SCI小鼠NGF中和抗体治疗,通过膀胱内压检测（CMG）,探索NGF在SCI小鼠膀胱过
研究背景:骨生成诱导因子（osteoglycin,OGN）是一种细胞外基质蛋白多糖,参与骨异位生成,以及肿瘤的发生和转移。近年来发现OGN基因表达与心脏肥大相关,提示该基因可能参与心血管功能调节,但其是否参与血管新生,相关研究尚属空白。研究目的:明确OGN是否参与缺血后血管新生,探索其可能的机制。研究方法和结果:收集下肢动脉疾病接受截肢手术的患者（n=3）和无下肢缺血病史的对照患者（n=2）的腓肠
排序择优算法是仿真与模拟领域中一种重要的随机运筹优化的求解方法。特别是在一些现实问题中,可能会遇到难以构建理论模型或无法求得解析解等情形,往往可以使用排序择优算法求解。一般而言,排序择优算法有两种最基本的思路,分别是频率法和贝叶斯法。虽然二者都以求得最优解为核心目的,但二者所追求的目标并不相同。频率法的目标是要确保选择最优解的概率达到要求,强调正确性;而贝叶斯法的目标是当总样本量给定时,通过有效的
目的:低氧诱导因子已被证明具有促进细胞多种生理功能的作用。本研究针对修复重建领域棘手的骨缺损、难愈性创面、肌腱韧带止点缺失的问题,应用低氧诱导因子的激动剂——VH298,探究其在面对上述问题时的治疗潜力,以及相关的机制。方法:在细胞实验当中,首先应用免疫印迹法测定VH298处理后,不同细胞内低氧诱导因子的表达量,建立明确的时间-效应、浓度-效应曲线,为后续的实验建立基础。本研究采用CCK-8法测定
研究背景:高血压血管重塑是导致人类心脑血管事件的重要病理学基础,但其发病机制目前尚未阐述清楚。我们研究小组及国内外学者证明血管外膜纤维化和炎症在血管重塑中的作用极其重要,血管外膜成纤维细胞在血管损伤中首先被激活,协同血管周围细胞分泌细胞因子、炎症介质等参与血管重塑过程。有研究报道转录抑制因子Krüppel-like factor 15（KLF15）调控靶器官纤维化过程,但KLF15尤其是其转录活性
目的:前列腺增生症是常见的泌尿系统疾病之一,经尿道前列腺电切术及铥激光前列腺切除术是手术治疗BPH的主要手段,但仍有不少患者在接受手术后会发生不同程度的短期或长期并发症,如尿潴留、尿路刺激症状、严重出血等。我们的前期研究表明前列腺尿道部再上皮化可能是解决BPH手术并发症的关键。本研究从比格犬动物手术模型出发,研究雄激素及非那雄胺对前列腺切除术后前列腺部尿道创面修复的影响。同时利用体外实验,通过前列
基于压缩感知的磁共振重建技术（Compressed Sensing Magnetic Resonance Imaging,CS-MRI）可以有效地解决磁共振扫描速度较慢的问题,是磁共振快速成像领域的研究热点。压缩感知技术使用非相干的随机k空间欠采样轨迹采集磁共振数据,并且利用图像的稀疏性,通过非线性优化的方法将欠采样的数据恢复出来,可以得到与原始图像质量相近的高质量重建结果。在CS-MRI框架下,
胰腺癌是恶性程度最高的肿瘤之一,近年来其发病率呈上升趋势,然而其发病机制仍未确切阐明。非编码RNA（non coding RNA,ncRNA）是一类不编码蛋白质的RNA分子,研究发现其对肿瘤的生物学行为具有重要的调控作用。根据非编码RNA的长度,可以将其分为微小非编码RNA（microRNA,miRNA）和长链非编码RNA（long nocoding RNA,lncRNA）。本研究中我们以miR
研究目的:1)FUT3在透明细胞性肾细胞癌患者肿瘤组织中的表达情况;2)FUT3的表达对透明细胞性肾细胞癌患者预后的影响,是否为独立危险因素;3)FUT3表达在透明细胞性肾细胞癌中的预后预测价值,为临床预测预后、分层管理病人提供新选择。研究类型:临床回顾性队列研究,406名组织病理学证实ccRCC患者组成的队列,随访74个月。研究方法和内容:运用组织微阵列的免疫组化染色,并进行半定量评分,来分析F
目的:构建强成骨性能的骨移植材料是骨科临床工作者及科研工作者面临的重大问题。在指端骨缺损再生过程中,甲床组织是保证骨再生的核心要素。但是其中的具体机制尚不明确。本课题旨在探索甲床内促进骨再生的结构特点及蛋白构成,并利用甲床组织设计和构建可供移植的生物支架,并研究其对骨缺损修复的作用和作用机理,为临床上治疗骨缺损提供新的思路和策略。方法:收集临床废弃的甲床组织,首先,通过组织学和高通量蛋白质组学分析