液体电谐振传感仪在诊断禽流感上的应用研究

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禽流感(avian influenza)是由A型流感病毒引起的一种禽类传染性疾病。近年来多项研究已表明,这类病毒可感染人类引起发病,称为禽流感病毒感染。禽流感给人类带来了巨大的经济损失和健康威胁。据中国动物卫生与流行病学中心国际兽医事物综合分析室公布的数据,2010年全球通报发生的诸多重大动物疫情中,禽流感疫情仍排在第一位,这就说明当前禽流感的疫情仍然严重,仍需要投入大量的人力物力,抑制或缓解这一疫情。传统的禽流感检测方法,如血凝和血凝抑制,对设备的要求不高,经济成本低,但对操作者的熟练程度要求很高,尤其对试验结果的分析和判定,不似其他诸如酶标仪等的判断结果具有直观性和机械性,而核酸检测技术中所用到的仪器,虽精确但大都价格昂贵,不适宜在基层做大量推广。液体电谐振传感仪在诊断禽流感上的应用研究,将传统的血凝和血凝抑检测方法之间作对比,旨在建立一种新的禽流感检测技术和开发新的检测仪器,达到以低廉的成本可以便捷的检测禽流感的目的,能够应用于检验检疫部门、防疫部门和医院。本课题研究的液体电谐振传感仪检测禽流感技术是属于生物传感仪技术的一种,其原理是利用抗原与抗体反应的特异性和和石英谐振换能器对表面质量负载变化的高度敏感性相结合,通过测定发生生化反应的液体电谐振频率的变化,来表征试验结果的一种新型压电免疫传感器的检测方法。将液体电谐振传感仪应用于禽流感的检测具有检测速度快、经济、灵敏性高等优点。并且,检测中用到的反应芯片按照规定的程序清洗后,可重复使用,适合大规模测试。一旦疫情发生,可做到有效地检测。本课题首先采用鸡胚培养法将试验中要大量用到的AIV标毒进行增殖,得到约70ml的AIV病毒尿囊液,再采用醛化红细胞吸附法对病毒进行纯化,得到两管病毒,1号管约6ml,2号管约5ml,同时紫外分光光度法计算得知1号管的浓度为18.31mg/ml,2号浓度为15.35mg/ml。将成熟的血凝试验和血凝抑制试验与液体电谐振试验作对比,当待测病毒稀释度在其效价范围内时,并且其谐振频率最小值小于300000Hz,液体电谐振传感仪测得的平均频移值与其稀释度的自然对数呈线性关系,且线性关系系数R2值接近1,判为血凝阳性。当待测病毒的稀释度低于效价时,其谐振频率大于300000 Hz,同时平均频移值与其稀释度的自然对数线性关系有较大的偏差,则此时的待测液的效价判为血凝阴性。
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