良好的肝脏生理状态是维持动物健康的重要前提。多种有害因素均可导致肝损伤,一旦肝脏受到损伤就会对机体造成极大的危害,甚至危及动物生命。近年来,由于集约化的养殖模式和抗生素的滥用等造成动物肝病的发病率明显增高,尤其免疫性肝损伤更为严重。动物免疫性肝损伤发生的机制非常复杂,目前尚未完全清晰。因此,进一步研究动物免疫性肝损伤的发生机制以及筛选有效缓解动物免疫性肝损伤的药物成为急需。已有部分研究证实,丹参多糖具有一定防治动物肝损伤的作用。然而,丹参多糖缓解动物免疫性肝损伤的具体机制尚不完全清楚。故本试验重点研究丹参多糖对LPS联合D-GalN诱导的免疫性肝损伤小鼠肝脏TLR4/MyD88信号通路和凋亡因子的调控作用,以便探讨动物免疫性肝损伤发生的可能机制以及为下一步将丹参多糖开发成防治动物免疫性肝损伤的新兽药提供理论依据。将120只昆明小鼠随机平均分为正常对照组,模型组,阳性药物(联苯双酯200mg/kg)对照组和丹参多糖低、中、高剂量(250 mg/kg、500 mg/kg、750 mg/kg)保护组。各用药组小鼠分别灌胃相应剂量的丹参多糖或联苯双酯,正常对照组和模型组小鼠则给予等量的生理盐水,连续灌胃12 d,1次/d。最后一次灌胃给药1 h后,正常对照组腹腔注射生理盐水,其他各组小鼠均腹腔注射LPS(10 mg/kg)和D-GalN(300 mg/kg)以建立小鼠免疫性肝损伤模型。造模完成3 h后,将各组小鼠摘眼球采血,然后颈椎脱臼处死,立即摘取肝脏固定做切片。采用HE染色法,观测各组试验小鼠肝脏的组织病理学变化;检测各组小鼠肝组织匀浆中MDA、SOD和GSH-PX的水平;ELISA法检测血清和肝组织匀浆中IL-1β和TNF-α的含量;免疫组织化学法检测肝组织中CXCL-10和ICAM-1的表达水平;qRT-PCR法检测肝组织中LBP、CD14、MD-2、TLR4和MyD88 mRNA的相对表达水平;Western blot法检测TLR4、MyD88、P-IKK-α/β、P-IκB-α和P-P65蛋白的表达水平以及分别采用Western blot法和免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中Bax、Bcl-2、Fas、Fas-L和Caspase-3(P17)的表达水平。结果表明,与正常对照组比较,模型组小鼠肝组织细胞肿胀,肝实质内有大量炎性细胞浸润和点片状坏死;肝组织匀浆中MDA含量显著升高(P<0.01),SOD、GSH-PX活性显著降低(P<0.01);血清和肝组织匀浆中TNF-α和IL-1β的含量显著升高(P<0.01);肝组织中CXCL-10、ICAM-1的表达水平,LBP、CD14、MD-2、TLR4和MyD88 mRNA的相对表达水平以及TLR4、MyD88、P-IKK-α/β、P-IκB-α和P-P65蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);肝组织中Bax、Fas-L和Caspase-3(P17)的表达水平也显著升高(P<0.01),Bcl-2表达水平显著降低(P<0.01),Fas表达水平差异不显著(P>0.05)。与模型组相比,丹参多糖各剂量组和阳性药物对照组小鼠肝组织细胞趋于完整,肝实质内炎性细胞和坏死数量明显减少;肝组织匀浆中MDA含量显著降低(P<0.01),SOD、GSH-PX活性显著升高(P<0.05或P<0.01);血清和肝组织匀浆中TNF-α和IL-1β的含量显著降低(P<0.05或P<0.01);肝组织中CXCL-10、ICAM-1的表达水平,LBP、CD14、MD-2、TLR4和MyD88 mRNA的相对表达水平以及TLR4、MyD88、P-IKK-α/β、P-IκB-α和P-P65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);肝组织中Bax、Fas-L和Caspase-3(P17)的表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),Bcl-2表达水平显著升高(P<0.01),Fas表达水平差异不显著(P>0.05)。各用药组之间综合比较,丹参多糖中剂量组调控各因子的效果最为显著(P<0.05或P<0.01)。结论:试验研究表明LPS联合D-GalN可导致小鼠肝脏产生过度的氧化应激、炎症反应和凋亡反应,最终引起免疫性肝损伤;丹参多糖可有效调控LPS联合D-GalN诱导的免疫性肝损伤小鼠肝脏TLR4/MyD88信号通路和凋亡因子,抑制肝脏内过激的过氧化反应、炎症反应和凋亡反应,进而缓解免疫性肝损伤。