降血脂益生菌选育及其特性研究

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本文通过对降血脂益生菌选育及其降解特性的研究,得出主要研究结果如下:1从样品中分离纯化并筛选出可耐受pH 1.5和0.3%胆盐的高效降解胆固醇菌株SL1和高效降解甘油三酯菌株BC1,初步鉴定分别为乳酸杆菌和蜡样芽胞杆菌。利用微波-硫酸二乙酯和超声波-硫酸二乙酯分别诱变SL1和BC1菌株,获得具有耐酸、耐高胆盐能力的突变株SL1-5和BC1-6,接种发酵48 h后培养基中胆固醇和甘油三酯的降解率分别可达82.9%和64.6%,分别提高了16.1%和36.5%,传代6代发酵试验结果表明其具有遗传稳定性。突变株SL1-5和BC1-6对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用。2对SL1-5菌株生长和发酵条件进行优化,确定其适宜生长的培养基为:蛋白胨12.5 g,牛肉膏12.5 g,酵母膏6 g,柠檬酸氢二铵2 g,葡萄糖25 g,磷酸氢二钾2 g,无水乙酸钠5 g,七水硫酸镁0.58 g,一水硫酸锰0.25 g,tween-801 mL。适宜生长的pH值和温度分别为pH 5.5、39℃。最适发酵培养基为:蛋白胨12.5 g,牛肉膏12.5 g,酵母膏6 g,柠檬酸氢二铵3 g,葡萄糖20 g,磷酸氢二钾2 g,无水乙酸钠5 g,七水硫酸镁0.86 g,七水硫酸亚铁0.83 g,一水硫酸锰0.25 g,胆固醇0.8 g,tween-80 0.5 mL。3对BC1-6菌株生长和发酵条件进行优化,确定其最适生长的培养基为:胰蛋白胨18 g、酵母膏10 g、NaCl 5g、葡萄糖6 g。最适发酵培养基为:胰蛋白胨15 g,酵母膏7.5 g,NaCl 5 g,七水硫酸亚铁1.4 g,甘油三酯10 mL。最佳发酵和生长的条件为pH 6.5、37℃、160 r/min。4 SL1-5菌株胞外和胞内均存在降解胆固醇的酶,且大多数位于胞外,降解过程中将胆固醇吸收进入胞内。BC1-6菌株降解甘油三酯的酶几乎都位于胞外,胞内极少,降解过程中不将甘油三酯吸收进入胞内。5本文筛选的SL1-5和BC1-6菌株经小鼠毒性试验证实为安全菌株。小鼠饲喂高脂饲料15 d后成功建立小鼠高脂血症模型。利用SL1-5和BC1-6菌悬液饲喂高脂模型小鼠16 d,小鼠血清胆固醇和甘油三酯水平均有所下降,其中SL1-5和BC1-6菌株混合饲喂组降血脂效果最好,小鼠血清胆固醇和甘油三酯水平分别下降了35.5%、14.2%,可见该菌株具有良好的降血脂功能。
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