论文部分内容阅读
目的本实验通过建立高脂STZ诱导并卵巢切除大鼠股骨骨折模型,研究2型糖尿病合并雌激素缺乏对骨折愈合的影响。方法2月龄健康雌性SPF级Sprague Dawley(SD)大鼠40只,适应性饲养1w后,随机分为四组(每组10只):1)骨折对照组(Sham+F组):普通饮食,第3w时腹腔内注射柠檬酸缓冲液,第4w时暴露腹腔,但不切除卵巢,第10w时行右侧股骨骨折手术;2)高脂STZ+骨折组(HFD/STZ+F组):高脂饮食,第3w时腹腔内注射STZ溶液,第4w时暴露腹腔,但不切除卵巢,第10w时行右侧股骨骨折手术;3)卵巢切除+骨折组(OVX+F组):普通饮食,第3w时腹腔注射柠檬酸缓冲液,第4w时行双侧卵巢切除,第10w时行右侧股骨骨折手术;4)高脂STZ+卵巢切除+骨折组(HFD/STZ+OVX+F组):高脂饮食,第3w时腹腔内注射STZ溶液,第4w时行双侧卵巢切除,第10w时行右侧股骨骨折手术。HFD/STZ+F与HFD/STZ+OVX+F组大鼠造模1w后尾静脉采血测随机血糖,血糖≥16.7mmol/L则为造模成功,定期监测各组大鼠体重、随机血糖;卵巢切除术、骨折手术术前30min、术后连续2d肌肉注射青霉素预防感染。各组大鼠骨折术后即时及3w后行X线摄影检查骨折及骨折愈合情况,并进行影像学评分;之后处死实验动物。股骨样本脱钙12w,石蜡包埋切片,行番红-O-固绿染色及组织学评级,COL-I免疫组化染色,免疫组化阳性蛋白表达行IRS评分。数据资料应用SPSS20.0软件进行统计学分析。结果1体重结果:第8w时,HFD/STZ+F组体重显著低于Sham+F组(P<0.05),OVX+F组体重显著高于Sham+F组(P<0.05);HFD/STZ+F组与HFD/STZ+OVX+F组体重显著低于OVX+F组(P<0.05);HFD/STZ+OVX+F组体重显著高于HFD/STZ+F组(P<0.05);第12w时,OVX+F组体重显著高于Sham+F组(P<0.05),HFD/STZ+F组与HFD/STZ+OVX+F组体重均显著低于Sham+F组与OVX+F组(P<0.05)。2血糖结果:第4、8、12周时,HFD/STZ+F组与HFD/STZ+OVX+F组随机血糖均显著高于Sham+F组与OVX+F组(P<0.05)。3影像学X线结果:1)骨折愈合评分结果,HFD/STZ+F组(1.44±0.52)、OVX+F组(1.64±0.20)与HFD/STZ+OVX+F组(1.22±0.44)均显著低于Sham+F组(2.49±0.53)(P<0.05),骨折愈合较差;2)骨痂面积结果,HFD/STZ+F组(1058.63±301.14)与HFD/STZ+OVX+F组(1375.13±390.60)均显著高于OVX+F组(690.38±288.12)与Sham+F组(611.25±57.53)(P<0.05),且HFD/STZ+OVX+F组(1375.13±390.60)显著高于HFD/STZ+F组(1058.63±301.14)(P<0.05)。4组织形态学结果:1)番红-O-染色,骨折愈合率HFD/STZ+F组(12.5%)、OVX+F组(20%)与HFD/STZ+OVX+F组(0)显著低于Sham+F组(70%)(P<0.05),骨折愈合较差;2)免疫组化结果,HFD/STZ+F组、OVX+F组与HFD/STZ+OVX+F组Col-1阳性表达IRS评分显著低于Sham+F(P<0.05),骨折愈合较差。结论1高脂STZ诱导延迟了大鼠股骨骨折愈合进程,提示2型糖尿病对骨折愈合有不利影响;2卵巢切除延迟了大鼠股骨骨折愈合进程,提示雌激素缺乏不利于骨折愈合;3高脂STZ诱导并卵巢切除延迟大鼠股骨骨折愈合进程,提示2型糖尿病合并雌激素缺乏同样不利于骨折愈合,且表现出较单一造模更为严重延迟骨折愈合进程的趋势。