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目的:体外研究磷霉素(Fosfomycin,FOM)单用及联合多粘菌素B(Polymyxin B,PB)对临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌(Multidrug Resistant Pseudomonas aeruginosa,MDR-PA)抗菌活性的影响;体内抗菌实验通过建立小鼠急性肺炎模型评价FOM单用及联用PB的体内抗菌作用。为临床医师对抗菌药物的合理应用提供基本的实验室依据。方法:(1)分别测定FOM、PB、多尼培南(Donipenem,DOR)、头孢曲松(Ceftriaxone,CRO)及左氧氟沙星(levofloxacin,LEW)对 117 株 MDR-PA的体外最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),其中 FOM 的测定方法为琼脂平板稀释法,其他抗菌药物均采用微量肉汤稀释法;应用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增5株待测PA对PB的耐药基因。应用96孔板棋盘法测定FOM联用PB对28株MDR-PA的联合抗菌活性,进一步评价两药联合是否具有协同作用;并通过时间-杀菌曲线实验观察FOM联合PB的协同杀菌活性。(2)选取对6株MDR-PA具有协同作用的药物组合,构建细菌生物膜模型并采用半定量结晶紫染色法评价各菌株生物膜形成能力及FOM单用和联用PB对生物膜的作用效应。(3)建立粒细胞减少小鼠MDR-PA感染的急性肺炎模型,通过观察组织病理切片及细菌菌落计数情况来评估两药单用及联用的体内功效。结果:(1)受检的117株MDR-PA大部分对DOR、CRO、LEW三种抗菌药物耐药,表现为多重耐药性。其中,对三代头孢菌素CRO的耐药率最高,其次是LEW,碳青霉烯类抗菌药物DOR耐药率为74.36%,FOM的敏感率为88.03%,PB表现出最高的抗菌活性,敏感率为94.02%,仅有5株从表型和基因型均对PB表现为耐药。对28株MDR-PA进行FOM与PB的联合应用后,大多数表现出协同作用,没有拮抗作用。时间-杀菌曲线研究显示,FOM和PB联合用药表现出协同作用和杀菌活性,在0.5×MIC和1×MIC药物浓度下的杀菌活性明显优于单药治疗组,且在与FOM联合应用后PB的再生现象均受到抑制。(2)所测6株细菌均能形成生物膜,在MDR-PA生物膜载体中经FOM和PB单药作用24小时后,生物膜半定量结晶紫染色法测得的OD值低于对照组,具有显著性差异(P<0.05),两药联合处理组OD值与各单药组相比,差异极显著(P<0.01)。(3)成功建立小鼠急性肺损伤模型,FOM+PB组合较单药组的组织肺泡壁、支气管等结构清晰,未观察到明显的组织病理学变化。结论:研究证实了 FOM和PB组合对MDR-PA具有体内和体外协同增效作用,并协同抑制MDR-PA产生的致病性生物膜。这些研究将为MDR菌感染的治疗提供新策略。