江苏野生水禽的禽流感本底调查及风险分析

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禽流感(Avian Influenza,AI)是由禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的一类对禽类急性高度接触性的传染性综合征,给我国养禽业巨大的经济损失,同时也对人类健康与安全造成了严重的威胁。目前,禽流感病毒的HA和NA亚型分别有18种和11种,其中H5、H7亚型的禽流感病毒力最强,也是目前的防治重点。野生水禽是禽流感病毒的天然宿主,随鸟类的迁徙极大地助推着禽流感病毒的传播。为减少禽流感对人类的影响,世界各国对禽流感高度关注,通过多种手段加强了对野生水禽的监控,采取积极地应对措施,将风险降到最低值。1.江苏野生水禽的禽流感本底调查为了了解江苏省野生水禽携带禽流感病毒感染情况,于2014年12月至2017年3月,在江苏盐城丹顶鹤保护区、大丰麋鹿保护区、盱眙洪泽湖、:徐州等地的20余种野生水禽进行了样品采集,并进行样品处理。利用E.Hoffmann等人设计的禽流感检测通用引物进行RT-PCR检测。结果显示,本次采集到的样品主要是鹤形目与雁形目水禽,涉及到大型迁徙候鸟与普通野生水禽,具很好的代表性;通过检测显示:605份样品中检测出50份阳性病例,江苏省野生水禽的禽流感病毒携带率为8.26%(50/605);其中鹤形目黑水鸡的病毒携带率最高为23.08%(3/13),雁形目中绿头鸭和天鹅的带毒率分别为10.94%(14/128)和10.71%(9/84),带毒率高于平均水平。2.江苏省野生水禽禽流感传播风险的定量评估参照世界动物卫生组织(OIE)指定的动物疫病风险分析理论与@Risk软件的建模条件建立了风险评估模型。该模型的评估对象包括:国内禽流感分布情况、禽类禽流感感染情况、温度对禽流感传播的影响、水禽迁徙过租的传播情况、禽流感的防治5个方面。通过运行@Risk软件,经过10000次迭代后得到风险评估结果,结果显示:江苏野生水禽禽流感风险值为2.003,介于中度风险与高度风险之间,属于高度风险级别;其中,各风险因子的回归系数表明江苏野生水禽的携带率对整个风险评估贡献值最高,回归系数为0.8,江苏湿地迁徙候鸟携带率、春秋季节、适宜禽类栖息地的分布对风险评估的贡献也较大。该评估结果提醒我们应当加强江苏省野生水禽的禽流感监控力度,制定禽流感的预防措施及应对办法。3.一株野鸭源H3N8亚型禽流感病毒的系统进化和分子遗传特征在江苏某湿地野生水禽中分离到一株禽流感病毒,为了解该毒株来源、流行特点、进化和分子遗传特征,对其进行全基因测序和遗传进化分析。将采集的野生水禽粪便经处理后,使用甲型禽流感通用荧光RT-PCR检测,阳性样品接种10日龄SPF鸡胚,收取24~96 h尿囊液,进行血凝试验,随后进行序列测定和分析,结果表明该毒株为H3N8亚型禽流感病毒,命名为A/Mallard/Xuyi/14/2015(H3N8)。HA蛋白的裂解位点氨基酸序列为PEKQTR↓GLF,无连续碱性氨基酸插入,符合典型低致病性禽流感病毒特征;HA与NA的糖基化位点没有发生突变;NA耐药性氨基酸位点出现突变位点;PB2蛋白第627和701位氨基酸分别为谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asn),是禽源流感病毒特征性氛基酸。在GenBank中对该毒株序列比对分析显示:与所测基因片段同缘性最高的10株毒株基本位于我国东部候鸟迁徙路线上。A/Mallard/Xuyi/14/2015(H3N8)株为江苏分离的低致病性禽流感病毒,基因主要来源于我国东部候鸟迁徙路线上的禽流感病毒。江苏位于我国东部候鸟迁徙带,湿地资源丰富,鸟类种类繁多,必须进一步加强禽流感免疫防治及迁徙候鸟的监测工作。
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