以地衣芽胞杆菌为研究对象,提取其基因组DNA,通过PCR方法扩增了耐高温淀粉酶的结构基因,全长1 449bp,将目的基因片断定向克隆到表达质粒pET-22b的BamHⅠ和HindⅢ位点之间,构建了重组表达质粒pET-22b-α-AMY,且在表达宿主菌E. coli BL21 (DE3)中得到有效表达,主要表达形式为可溶性蛋白。同时将目的基因片断定向克隆到穿梭表达质粒pPIC9的EcoRⅠ和NotⅠ位点之间,构建了重组表达质粒pPIC9-α-AMY,且在表达宿主菌毕赤酵母GS115中得到有效表达,主要表达形式为上清。对表达产物进行纯化,并对纯化后蛋白的酶活性、酶最适温度和最适pH值等相关性质进行了分析研究,发现:原核表达可溶性中的酶活力较原始菌株提高了三倍,真核表达上清液中的酶活力较原始菌株提高了十倍;最适作用温度均为90℃;最适pH值均为6.0～6.5,等电点分别为5.5和5.8,稳定pH值范围均为4～11.5。实验的结果表明,地衣芽胞杆菌耐高温α-淀粉酶基因工程菌具有良好的发酵生产性能,为在将来工业生产中应用奠定了重要的基础。