研究背景与研究意义先天免疫系统是宿主抵御病原体入侵的第一道防线,是从无脊椎动物到脊椎动物都具有的防御机制。损伤相关模式（Damage associated molecularpatterns,DAMPs）是生物体自身受到免疫刺激,损伤时释放的细胞内源性分子,可以作为危险信号,被免疫相关细胞表面的模式识别受体识别,进一步激活下游相关信号转导,激发免疫反应。高迁移率族蛋白1（High mobility group box 1,HMGB1）是一种经典的DAMPs,对其在高等动物免疫中有比较深入的研究,然而其是否也在无脊椎动物免疫中发挥作用这尚不清楚。对虾是沿海国家包括我国重要的海水经济养殖动物,但各种病原微生物的侵害给对虾养殖产业造成了巨大的损失,深入研究对虾HMGB1同源蛋白在对虾免疫反应中发挥的功能与分子机制不仅可以加深对对虾免疫机制的深入了解,还可以为虾病治疗提供理论依据,同时加深对HMGB1蛋白功能与进化的了解,为其它动物中该蛋白的相关研究提供借鉴。研究结果本论文,结果如下:1.MjHMGBa作为DAMPs分子通过Toll6-Dorsal-AMPs通路抑制白斑综合症病毒复制在本研究中,克隆得到两种HMGB1同源蛋白,并命名为MjHMGBa和MjHMGBb。在白斑综合症病毒（White Spot Syndrome Virus,WSSV）感染对虾6h时,MjHMGBa在血浆中的含量显著上升,表明病毒感染会促进该蛋白分泌到血淋巴中发挥功能。利用外源注射,抗体封闭和体内干扰等方法研究表明,分泌后的胞外MjHMGB1可以促进对虾细胞中转录因子Dorsal的入核以及几种抗脂多糖因子（Anti-lipopolysaccharide factor,ALF）和对虾素（Penaeidins）类抗菌肽（antimicrobial peptide,AMP）的表达。同时,体内RNAi筛选研究表明,对虾Tol16受体在识别分泌型MjHMGB1,启动下游Dorsal入核和抗菌肽表达中发挥着重要作用。以上研究结果表明,在对虾中的HMGB1同源蛋白在WSSV感染对虾时,作为损伤相关分子模式从细胞中释放出去,通过Toll6-Dorsal-AMP途径激活相关免疫效应因子的表达,促进抗病毒免疫功能。2.细菌感染促进对虾中MjHMGBa分泌至胞外,通过结合细菌和促进血细胞吞噬功能帮助对虾清除体内细菌在本研究中,通过体内干扰试验,敲低MjHMGBa和MjHMGBb,对虾细菌清除能力下降,并且血细胞的吞噬能力也下降。表明二者可以促进对虾抗细菌免疫过程。研究表明,在细菌感染对虾体内,MjHMGBa在血浆中的含量显著增强,表明该蛋白在细菌感染后可以分泌到血浆中发挥功能。细菌结合试验表明,MjHMGBa蛋白和四种革兰氏阴性菌,四种革兰氏阳性菌均有一定程度的结合。外源蛋白注射和体内干扰等方法研究表明,分泌型MjHMGBa可以通过SRB2受体促进对虾血细胞对细菌的吞噬。以上研究结果表明,在对虾中的HMGB1同源蛋白可以作为损伤相关分子模式,通过SRB2受体促进对虾血细胞对细菌的吞噬,参与对虾抗细菌免疫反应。研究创新点及总结本研究阐明了 HMGB1同源蛋白MjHMGBa在对虾先天免疫中的功能和作用机制。创新点总结如下:（1）证明对虾MjHMGBa在WSSV感染时发挥DAMPs的作用,通过MjToll6受体促进MjDorsal的核移位以诱导效应抗菌肽的表达来抑制WSSV的感染。（2）证明在细菌感染的对虾中,MjHMGBa可以结合细菌,发挥DAMP功能,通过SRB2受体促进血细胞的吞噬功能,促进对虾的抗细菌免疫过程。