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【目的】 引入四聚体技术研究乙肝病毒核心抗原(HBcAg)特异性CD8+细胞毒T淋巴细胞(CD8+CTL)及相关细胞因子与HBVDNA、ALT之间的关系,从而探讨其在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。 【方法】 应用人类主要组织相容性复合体(HLA)A2的胞外段与HBcAg表位肽Tc18-27构建的四聚体(Tetramer)结合流式细胞术检测人外周全血中该表位肽特异的CD8+CTL的数量,并以其占CD8+细胞总数的百分比表示。同时用Roche light-cycler荧光PCR检测仪检测人外周血清HBVDNA的拷贝数、用全自动生化分析仪检测肝功能(ALT等指标)及用双抗体央心ELIISA法检测细胞因子IL-12和INFγ的水平,并进行统计学分析。 【结果】 ①34例HLA-A2+慢乙肝(CHB)患者外周全血中HBcAg特异性CD8+T细胞(HBv sCTL)中位数为0.03%(0.00-0.42%),14例HLA-A2+无症状携带者HBV sCTL中位数为0.04%(0.01-0.35%),HLA-A2+急性HBV感染者HBV sCTL中位数为0.65%(0.01-1.17%),HLA-A2+健康正常人中位数为0.02%(0.00-0.05%),组间比较显示HLA-A2+慢乙肝患者、无症状携带者和急性HBV感染者HBV sCTL水平均较正常对照升高(P<0.05);并且HLA-A2+急性HBV感染者HBV sCTL水平较慢性HBV感染者明显升高(P<0.01),差异有显著性。并且②经spearman秩相关分析并绘制散点图显示Tc18-27表位肽特异性CTL与HBVDNA定量及ALT之间没有特定的相关关系(r_s分别为0.083,-0.010,-0.17,P>0.05)。但按照血清HBVDNA定量水平高低将HLA-A2+慢乙患者分为若干组,分析其外周血Tc18-27表位肽特异性CTL的比率与正常人相应值的差别,结果只有HBVDNA定量≦1000cps/ml组、10万～100万cps/ml组、100万～1000万