两株拮抗菌的发酵条件、定殖动态及生防效果研究

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jees_giggle
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
土传病害是植物病害中较难防治的一类病害。本研究对土传病害—大豆根腐病的生物防治进行了研究。从大豆根围土壤中分离筛选出13株对大豆根腐病有拮抗作用的细菌。通过平板对峙法检测,菌株BRF-1和BRF-2对供试的7株病原菌均有拮抗作用。依据生理生化特征并用16SrRNA分子技术鉴定BRF-1和BRF-2菌株的分类地位,通过测定菌株发酵培养液的OD吸收值、单位体积发酵液的含菌量以及无菌滤液的抑菌圈半径等指标,研究了影响两株生防细菌拮抗物质产生的因素、拮抗物质的提取方法及其理化性质。利用抗药性标记研究了两株细菌的定殖动态,分别用平皿计数法和变性梯度凝胶电泳(DGGE)法研究了两株拮抗菌对土壤微生物数量和多样性的影响,并利用盆栽试验研究了对大豆根腐病的生防效果。取得的主要结果如下: 1.利用三层筛选法从大豆根际分离出13株对茄腐镰孢菌(Fusariumsolani)具有拮抗作用的细菌,抑菌圈半径在2mm-12mm之间。其中两株拮抗作用较好的BRF-1、BRF-2菌株对尖孢镰孢菌芬芳变种(F.oxysporumVar.vedolens),茄腐镰孢菌(F.solani),禾谷镰孢菌(F.graminearium),立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani),菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum),蕃茄枯萎菌(F.oxgsporumf.sp.lycopersici)和黄瓜尖孢镰孢菌(F.oxysporumf.sp.cucumerinum)也具有拮抗作用。 2.经过生理生化鉴定和16SrRNA分子技术鉴定,BRF-1菌株为类芽孢杆菌(Paenibacillustaejonensi),BRF-2为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。 3.拮抗物质的产生条件实验:BRF-1菌株在装液量为20mL/250mL三角瓶、pH值为7.0的PSS培养基培养24h条件下,生长量和拮抗活性达到最大值。BRF-2菌株在装液量为20mL/250mL三角瓶、pH值为7.0的PSS培养基培养72h条件下,生长量和拮抗活性达到最大值。 4.拮抗物质的提取和性质:用硫酸铵沉淀可将BRF-1菌株产生的拮抗物质析出,拮抗物质含有低分子量的肽类物质,对高温高压及蛋白酶k稳定,对碱不稳定。BRF-2菌株产生的拮抗物质可用固体浸提的方法提取,特征为非蛋白类的水溶性的抗生素,对高温部分敏感,不耐强酸和强碱。 5.定殖动态:两株拮抗菌均能在土壤中很好定殖,接种后48d,BRF-1仍能维持在3.16×103CFU/克土壤以上,BRF-2能维持在6.3×104CFU/克土壤以上。菌株BRF-1和BRF-2均对土壤微生物数量和多态性产生不同程度影响,能提高土壤健康水平。 6.盆栽防效:BRF-1菌株和BRF-2菌株对大豆根腐病具有较好的防治效果,同时能够促进幼苗生长。
其他文献
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种常见的以持续气流受限为特征的可预防和治疗的呼吸系统慢性疾病.随着对该疾病发病机制的研究深入,发现
从北京、广州、云南、湖南、四川、新疆采得105份土样,在高氏一号选择性培养基上分离得到912个放线菌菌落。其中,对烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)有拮抗作用的放线菌
目的:浅析牙髓病及根尖周病治疗中根管治疗一次法治疗的临床效果.方法:筛选2017年1月—2017年6月新疆军区总医院收治的48例牙髓病及根尖周病患者为研究对象,平均分组时利用双
异色瓢虫Harmoniaaxyridis(Pallas)是一种用于农田防治害虫的重要天敌昆虫。目前,工厂化饲养的异色瓢虫仍存在扩繁难的问题,所以,本研究采用活体食物豌豆蚜Acyrthosiphonpisum、甜
烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是热带、亚热带及相邻温带地区主要害虫之一(Mound and Halsey,1978; Oliveira et al., 2001)。20 世纪80 年代以来,随着花卉和其它植物苗木
根癌农杆菌是广泛应用于植物转基因的载体系统,是转化双子叶植物最常规的方法,近些年利用农杆菌介导单子叶植物的转化发展较快,在水稻、玉米上已经有比较成熟的转化方法,对于小麦来说,虽然在1997年就获得了突破,但经过近七年的发展,农杆菌介导法依然没有成为小麦基因转化的主导方法。原因之一是由于小麦组织培养难度高、品种依赖性强,其二是受体材料单一、方法单一。 本实验选取了小麦生长发育过程的两个时期:种
目的:探讨对阻塞性肺疾病急性加重期患者应用布地奈德联合特布他林的治疗效果.方法:选择2016年10月—2018年2月在我院治疗的慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者36例为研究对象,
目的:探究心理护理干预对卵巢囊肿手术患者的影响.方法:抽取2017年5月至2018年4月我科室诊治的68例卵巢囊肿患者资料,以均衡原则为基准,分为观察组与对照组.分别施以心理护理