论文部分内容阅读
目的：建立大鼠体内葛根血清药物化学动态指纹图谱研究的高效液相色谱方法，对大鼠灌胃葛根提取物后不同时间点血浆中化学成分进行分析，同时对葛根中主要活性成分大豆苷元、葛根素的药动学进行研究。方法：以Cosmosil C-18柱为分析柱，采用流动相甲醇（A）与1％醋酸（B）进行梯度洗脱，用DAD检测器190～400nm进行检测，254nm进行数据采集，柱温为40℃，流速为0.8ml／min。大鼠灌胃葛根提取物后0～240min内于大鼠股动脉采集血样，用6％高氯酸处理血浆，以非那西丁为内标。处理后的血样采用HPLC分析建立葛根血清药物化学动态色谱图，同时，对大豆苷元、葛根素进行定量分析，绘制血药浓度-时间曲线图，用DAS1.0软件估算相应的药动学参数。结果：①给大鼠灌胃葛根提取物（4g／kg）后在0，2，5，10，15，20，30，60，90，120，180和240分钟的血清化学图谱中，先后有7个峰出现，且峰面积随时间不同呈动态变化。其来源可能有以下三方面：a．葛根提取物中的原型物质直接进入体内；b．药物的代谢产物；c．药物作用于机体后产生的内源性物质。②葛根素和大豆苷元的标准曲线分别为y=3.4403x—0.1030（0.2-20.0μg／mL）和y=5.4474x+0.2222（0.1-10.0μg／mL），其相关系数分别为0.9991和0.9992。日内日间准确度均高于96％，精密度RSD均小于6％，回收率均大于98％，其最低定量限分别为10和20ng／mL。在以4g／kg的剂量（分别相当于葛根素173.25mg／kg大豆苷元67.5mg／kg）给大鼠灌胃葛根提取物之后，葛根素吸收半衰期t1／2ka=0.010h，消除半衰期t1／2β=1.4h，达峰时间为Tmax=0.16h，最高血药浓度为Cmax=8.375μg／mL；大豆苷元吸收半衰期t1／2ka=0.019h，消除半衰期t1／2β=5.2h，达峰时间为Tmax=0.11h，最高血药浓度为Cmax=1.767μg／mL。结论：①葛根提取物给大鼠灌胃给药后，随着时间的推移，血清中的移行成分会发生质与量的动态变化。因此，在血清药物化学研究中，仅仅在给药后单一时间点采集血样进行研究所得的数据不全面。②本文建立的高效液相色谱方法，简单、灵敏、准确，可用于葛根血清药物化学动态指纹图谱及葛根素、大豆苷元的药动学研究。创新性：①首次描述了大鼠灌胃葛根提取物后的血清药物化学动态指纹图谱，并对血中移行成分进行了动态分析；②首次同时测定了给大鼠灌胃葛根提取物后体内葛根素和大豆苷元的血药浓度并估算了其相应的药动学参数；③首次计算并比较了大鼠灌胃大豆苷元单体和葛根提取物后血浆中大豆苷元药动学参数的差异。