益生芽孢杆菌的筛选及动物饲喂试验

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抗生素滥用现象越发明显,国家越来越重视无抗养殖,因此,筛选优良的益生菌作为抗生素的替代品成为一个研究热点。研究表明,益生菌不仅能够提升畜禽饲料利用率,提高生长速度;还具有提升畜禽免疫功能的作用。芽孢杆菌作为一种益生菌,具有良好的抗逆性,通过高温、胆盐和强酸环境筛选到的芽孢杆菌不仅能抵抗胃酸环境不会失活,而且还能在肠道内定殖,发挥益生功能。本研究从健康保育猪肛拭子中成功分离到59株芽孢杆菌,经抑菌试验筛选到3株对大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌均具有抑制作用的芽孢杆菌。生理生化特征及16Sr DNA分子鉴定表明1株为枯草芽孢杆菌(命名T5),2株为解淀粉芽孢杆菌(分别命名为W26和40c1a)。对筛选出来的3株芽孢杆菌进行抗逆性比较实验,结果显示:W26菌株在抗逆性上有着突出优势,经p H为3.0的HCl处理3 h成活率为69%;经猪胆盐处理3 h成活率为87%;100℃水浴15 min成活率为75%;同时W26菌株产蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶的能力也比较好;对大多数兽用抗生素敏感。利用W26菌株低、中、高浓度菌液灌胃小鼠21 d,研究菌株在小鼠体内的益生性和安全性。结果表明:实验期间小鼠无异常现象,无菌剖解后,小鼠脏器指数无显著差异(P>0.05),小肠病理切片未见病理变化;高剂量组(1×10~9cfu)能够显著增加小鼠体重(P<0.05),促进小鼠生长性能;血清生化试验结果表明W26菌株高剂量试验组小鼠相较于空白对照组(生理盐水)小鼠血清中葡糖、碱性磷酸酶、白蛋白、血清总蛋白和球蛋白均呈升高趋势;尿素、肌酐、谷草转氨酶、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白均呈降低趋势。通过9型猪链球菌SS9-P10攻毒小鼠试验发现,W26菌株能显著降低9型猪链球菌SS9-P10对小鼠的致死率,其中灌胃W26菌株高剂量试验组小鼠死亡率仅为37.5%,提示W26菌株对机体免疫系统抵抗病原微生物有着积极作用。
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