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干扰素在机体免疫应答调控中处于中心地位,它可以诱导细胞产生一系列具有多种生物学效应的蛋白。p204是小鼠干扰素诱导产生的p200蛋白家族的成员,在调控细胞增殖、细胞周期等方面具有极其重要的作用。p204及其人源蛋白IFI16还可以作为细胞质内双链DNA感受器,探知细胞质内的DNA分子并诱导IFN-α/β的表达。此外,IFI16在体外实验中被证实可以抑制多种肿瘤细胞的增殖,其表达量在肿瘤细胞中显著下降。p204和IFI16在免疫系统中占据重要地位,构建p204基因敲除型小鼠对于深入研究p204在免疫系统中的作用具有十分必要的意义。我们利用p204flox/+小鼠与Sox2-creTg/+小鼠进行杂交,成功得到了世界上首例全身性p204基因敲除小鼠。以遗传背景相同的p204基因敲除小鼠与野生型小鼠(C57BL/6)为研究对象,探究p204基因敲除对小鼠免疫系统的影响。实验发现p204基因敲除型小鼠在生长、繁殖、活动、进食、毛色及体温等方面与野生型小鼠并无明显差异。使用荧光定量PCR法对两种小鼠心脏、脾脏以及胸腺中其他p200蛋白家族成员(p202、p205、p210)的表达水平进行检测,发现p204基因敲除导致了其家族成员p202、p210表达量的显著性上升(p<0.05),而相应脏器指数的测定则显示了p204敲除对小鼠脾脏的影响最为明显(P<0.05)。使用CD19、CD3、CD4以及CD8的抗体对两种小鼠脾脏中淋巴细胞进行标记后用流式细胞术检测B淋巴细胞、T淋巴细胞及其亚群所占的比例,发现p204基因敲除后,小鼠脾脏中T淋巴细胞,尤其是CD8+T细胞比例显著下降(p<0.01)。使用刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)对脾脏中淋巴细胞进行刺激,并计算其刺激指数后发现WT小鼠脾脏淋巴细胞的转化率显著高于p204基因敲除型小鼠(P<0.05)。而使用YAC-1细胞对NK细胞杀伤力进行测定的实验结果也显示WT小鼠的NK细胞杀伤活性显著高于p204基因敲除型小鼠(P<0.01)。以上结果表明,p200家族成员之间具有复杂的调节网络与补偿机制,p204基因敲除导致小鼠脾脏中发挥免疫功能的淋巴细胞和NK细胞的数量及其活性降低,致使小鼠免疫功能下降。由此推论:p204基因可能参与调控T淋巴细胞的发育和分化,并在抗肿瘤免疫中起作用。本研究的创新点在于:1)首次成功构建了全身性p204敲除小鼠;2)首次发现了 p204的缺失会导致小鼠CD8+淋巴细胞比例显著性下降和NK细胞杀伤能力下降。这些发现将为深入了解p204与IFI16在免疫系统中所起的作用奠定基础。