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共轭亚麻酸（Conjugated linolenic acid,CLNA）由亚麻酸（Linolenic acid,LNA）衍生得到,是一类具有共轭二烯型或共轭三烯型双键的十八碳三烯脂肪酸的位置和顺（cis）反（trans）几何异构体的总称,具有抗癌、抗炎、抗氧化、抗心血管疾病、减肥等多种生理功能。乳酸菌来源CLNA异构体的结构不同于植物来源和化学合成的CLNA,这些结构的不同直接导致异构体功能的差异。目前乳酸菌源CLNA单一异构体的功能未知,并且尚无分离制备CLNA单一异构体的有效方法。本文建立了乳酸菌源CLNA的分离方法并获得单一异构体,对CLNA单一异构体诱导结肠癌细胞死亡的作用进行研究,主要结果如下:（1）对薄层色谱（TLC）和高效液相色谱（HPLC）技术进行比较,基于HPLC建立了乳酸菌源CLNA的分离制备方法并获得单一异构体。通过优化TLC条件中上样量及展开剂比例和pH值以及HPLC条件中高效液相色谱柱的种类、流动相种类及比例,最终得到制备乳酸菌源CLNA的最优条件如下:高效液相色谱柱为Ultimate?（5XB-C30;10×250 mm）;流动相为甲醇-水-甲酸（80∶20∶0.01,v/v）;流速为5 m L/min;检测波长为205 nm和233 nm。GC-MS检测制备得到的CLNA1（cis9,trans11,cis15-CLNA）、CLNA2（trans9,trans11,cis15-CLNA）和CLNA3的纯度分别为97.48%,99.99%,65.30%。CLNA3的制备量和纯度未达到实验要求,所以选择CLNA1和CLNA2进行后续实验。（2）研究了乳酸菌源CLNA单一异构体诱导结肠癌细胞死亡的作用并比较其差异。利用MTT检测细胞活力,结果显示CLNA1和CLNA2诱导三种结肠癌细胞Caco-2、SW480、HT-29死亡均呈剂量和时间依赖性,且其诱导Caco-2细胞死亡的IC50值最小均在20μM左右。选定Caco-2细胞为受试细胞,通过添加不同细胞死亡方式抑制剂,得到初步结果为:CLNA1通过氧化或凋亡引起Caco-2细胞死亡;CLNA2通过氧化、凋亡或坏死诱导Caco-2细胞死亡。（3）探索了乳酸菌源CLNA诱导Caco-2细胞死亡的机制。通过流式细胞术检测到CLNA1和CLNA2诱导Caco-2细胞死亡时,均未产生活性氧,细胞周期均未改变,但细胞发生了凋亡或坏死,并且CLNA2的诱导能力比CLNA1强。Western Blot结果显示Caco-2细胞的凋亡途径蛋白PARP-1、Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9均未被切割;RT-qPCR结果显示凋亡相关因子PPARγ、TNF-α和TGF-β的转录水平未改变。因此,研究结果表明CLNA1可能依赖于非Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9途径的细胞凋亡引起Caco-2细胞死亡,CLNA2可能依赖于坏死或非Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9途径的细胞凋亡诱导Caco-2细胞死亡,并且CLNA2诱导Caco-2细胞死亡的能力比CLNA1强。