【摘 要】
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脱落酸(ABA)作为一种植物的重要激素,不仅在植物的生长发育等过程起着重要的作用,而且还可以通过诱导植物的抗氧化防护系统以参与调节植物对多种胁迫(干旱、盐害等)的应答反
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脱落酸(ABA)作为一种植物的重要激素,不仅在植物的生长发育等过程起着重要的作用,而且还可以通过诱导植物的抗氧化防护系统以参与调节植物对多种胁迫(干旱、盐害等)的应答反应。大量研究表明,许多信号分子,比如过氧化氩(H202)、一氧化氮(NO)和钙离子(Ca2+),以及蛋白激酶,比如促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)和钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶(CCaMK)都参与这一过程。但目前对于CCaMK如何参与ABA诱导的抗氧化防护系统的机制尚不清楚。实验室前期利用酵母双杂交技术筛选出与ZmCCaMK可能存在相互作用的转录因子ZmWRKY62。本文进一步验证了 ZmCCaMK和ZmWRKY62互作的真实性,并且以玉米农大108为材料,研究了ZmWRKY62在ABA诱导的抗氧化防护中的功能,结果如下:1.利用GST-pulldown技术、双分子荧光互补技术(BiFC)和免疫共沉淀技术(Co-IP)证实ZmWRKY62和ZmCCaMK在体内外存在直接互作关系;2.ABA可以显著诱导ZmWRKY62在90 min表达量达到最大质值,ZmCCaMK的表达量在30 min达到峰值;3.利用玉米原生质体瞬时表达体系,瞬时过表达ZmWRKY62可以增加抗氧化防护酶APX和SOD活性,瞬时沉默ZmWRKY62可以降低抗氧化防护酶APX和SOD活性,外源施加ABA处理后瞬时过表达ZmWRKY62抗氧化防护酶活性进一步上升,但外源施加ABA处理不能增加ZmWRKY62沉默后抗氧化防护酶活活性;4.瞬时表达ZmWRKY62转化玉米原生质体发现,细胞内H202积累量增加,瞬时沉默ZmWRKY62细胞内H202积累量降低,外源施加ABA后瞬时过表达ZmWRKY62细胞内H202的积累量增加,瞬时沉默ZmWRKY62的细胞内H202的含量没有变化;由上述实验结果表明ZmWRKY62与ZmCCaMK在体内体外存在相互作用,且ZmWRKY62和ZmCCaMK都参与ABA诱导的抗氧化防护过程,但是两者之间的关系还待进一步的研究。
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