石斛属植物是兰科附生植物,既有很高的观赏价值也是名贵的中药材。WRKY家族是一类重要的转录因子,在植物生物、非生物胁迫和生长、发育、衰老的过程中都具有重要的调控作用。虽然关于WRKY转录因子功能的研究很多,但是WRKY转录因子的作用机制并不是非常清楚,有进一步研究的价值。此外,目前关于WRKY转录因子的研究主要集中在模式植物中,药用植物石斛中的WRKY转录因子研究非常少,研究石斛WRKY转录因子的功能具有重要的理论意义和应用价值。本研究从金钗石斛中分离得到一个第Ⅱ家族的WRKY基因,通过生物信息学分析、基因组织特异性表达分析和过量表达烟草植祩抗性分析等方法初步探究了该石斛WRKY基因的功能,主要研究结果有：(1)对实验室石斛cDNA文库中已知WRKY基因的部分序列设计引物,利用RACE技术,从石斛中分离得到一个WRKY基因,命名为DnWRKY11,其序列全长1135bp,包含47bp的5’非编码区和167bp的3’非编码区,编码306个氨基酸,有一个WRKY结构域,锌指结构是C2H2类型。(2)利用Real-Time qPCR分析金钗石斛中DnWRKY11组织特异性表达,发现金钗石斛中Dn WRKY11在叶中表达量最高,根中次之,茎中表达量最低,叶的表达量约是根中的4.5倍。(3)构建DnWRKY11的过量表达载体,利用农杆菌侵染的方法转化烟草,得到DnWRKY11的过表达植株,并研究了DnWRKY11过表达烟草的种子和幼苗对干旱(甘露醇)和盐(NaCl)这两种非生物逆境的响应情况。结果显示,相比野生型烟草,转基因烟草的种子和幼苗对干旱和盐胁迫表现出一定的调控能力,发芽率比野生型高,根长较长。(4)干旱胁迫条件下,野生型烟草比转基因株系积累了更多的丙二醛,并且转基因烟草中3种与氧化胁迫有关酶的活性要高于野生型烟草,表明野生型烟草受到了更大的氧化胁迫,DnWRKY11转录因子在调节氧化胁迫方面起到了一定的积极作用。转基因和野生型烟草中抗旱相关基因NtERD表达量的分析表明在超表达烟草中NtERD的表达量都有上调,T1-22转基因株系中其表达量明显高于其他烟草,是野生型烟草表达量的5.4倍。以上这些结果表明在超表达烟草中,DnWRKY11参与了烟草干旱胁迫应答过程,在干旱胁迫的反应中是一个正调控因子,起积极的作用。