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目的:采用钳夹大鼠胸10脊髓制作急性脊髓损伤模型,通过分析大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)后动物行为学和组织病理学的变化,初步探索蜘蛛香环烯醚萜类有效部位(Iridoids effective fraction of Valeriana jatamansi Jones,IEFV)对ASCI大鼠运动功能恢复的影响,并通过检测血清超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性和丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量、脊髓组织脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)和神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)表达情况来初步探讨IEFV对急性脊髓损伤的作用机制,为蜘蛛香药物应用于脊髓损伤的临床治疗提供了理论支撑和实验依据。方法:选用医用迷你型临时脑动脉瘤夹(标定力70g,钳夹10s)制备胸10钳夹型脊髓损伤大鼠模型。将96只SPF级成年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成如下六组(每组大鼠雌雄各半):假手术组(CMC-NA灌胃)、模型组(CMCNA灌胃)、甲强龙组(60mg/kg/d甲强龙灌胃7天,7天后CMC-NA灌胃)、IEFV低剂量组(5mg/kg/d IEFV灌胃)、IEFV中剂量组(10mg/kg/d IEFV灌胃)及IEFV高剂量组(20mg/kg/d IEFV灌胃),实验周期八周。各组大鼠在术前1d及术后1w、2w、4w、6w、8w均进行行为学评价(包括BBB评分和斜板试验),以便测评ASCI大鼠后肢的运动功能改善状况;8周时处死大鼠取血清通过ELISA法检测SOD活力和MDA含量,取脊髓组织样本通过苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色以及透射电镜观察六组大鼠脊髓组织结构的改变,通过免疫组织化学法测定六组大鼠SCI区BDNF及NGF蛋白的表达情况。结果:1.IEFV对大鼠后肢运动功能恢复情况的影响(1)BBB评分显示:中后期IEFV干预组和甲强龙组后肢运动功能均比模型组改善明显,IEFV能促进大鼠运动功能恢复。(2)斜板试验显示:IEFV中剂量组、IEFV高剂量组和甲强龙组后肢运动功能均较模型组改善明显,说明IEFV能促进大鼠运动功能恢复。2.IEFV对脊髓组织病理学的影响(1)HE染色显示:IEFV高剂量组、IEFV中剂量组及甲强龙组脊髓损伤病变程度较模型组轻,说明IEFV能够减轻脊髓损伤。(2)透射电镜显示:IEFV高剂量组、IEFV中剂量组及甲强龙组脊髓损伤病变程度较模型组轻,IEFV能够促进脊髓病理损伤的恢复。3.IEFV对血清SOD活力和MDA含量的影响(1)ELISA法检测SOD活力:各组大鼠血清中SOD活力两两比较均无明显差异(P>0.05)。(2)ELISA法检测MDA含量:与模型组相比,IEFV中剂量组、IEFV高剂量组大鼠血清中MDA浓度极显著降低(P<0.01);与甲强龙组相比,IEFV中剂量组、IEFV高剂量组大鼠血清中MDA浓度显著降低(P<0.01)。4.IEFV对脊髓组织神经生长因子的影响(1)免疫组化检测BDNF蛋白:假手术组、甲强龙组、IEFV高剂量组、IEFV中剂量组BDNF蛋白含量与模型组相比均显著升高(P<0.01),显示IEFV对脊髓继发性损伤具有神经保护作用。(2)免疫组化检测NGF蛋白:与模型组相比,IEFV低剂量组NGF蛋白含量显著降低(P<0.01);IEFV中剂量组NGF蛋白的含量无明显差别(P>0.05);但甲强龙组、IEFV高剂量组NGF蛋白含量显著升高(P<0.01),表明IEFV可促进损伤脊髓神经生长因子表达。结论:1.甲强龙、IEFV均可促进ASCI大鼠后肢运动功能的恢复,较好的减轻和延缓脊髓损伤后的病理损害程度,中药蜘蛛香在ASCI后中晚期的整体调节作用优势明显,且副作用明显小于甲强龙冲击疗法。但IEFV对ASCI大鼠的疗效与药物浓度不呈量—效关系,以中剂量较佳。2.本研究初步探索了IEFV对脊髓钳夹损伤模型大鼠具有一定的神经保护作用,其作用可能通过使MDA含量降低及促进BDNF和NGF神经营养因子表达有关。