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背景与目的原发性肝癌(primary hepatocellular carcinoma,PHC)是我国常见的恶性肿瘤之一,其中原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)占原发性肝癌的90%以上,发生率高,发病隐匿,早期无临床症状,故临床发现时多已为晚期,死亡率较高。HCC的发生发展是一个多阶段、多步骤、多因子参与的过程,机制十分复杂。环氧化酶(cyclooxygenase,COX)是前列腺素(prostaglandins, PGs)合成过程中的一个限速酶,包括COX-1和COX-2两种,COX-2为诱导型,称为“快速反应基因”,在正常生理状态下多数组织内检测不到,但当细胞接受相应细胞因子、内毒素、促肿瘤剂以及癌基因等刺激后可诱导性表达,有文献报道,COX-2在多种恶性肿瘤中(肝癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌等)呈高表达,通过多种机理参与肿瘤的发生、发展和转移,参与多种病理生理过程,包括急慢性炎症、疼痛和肿瘤等。上皮型钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)是一类依赖Ca2+的细胞间跨膜黏连糖蛋白分子,与胞浆中的β-环连蛋白结合形成复合体,用以维持细胞间黏附的稳定性和细胞的极性,主要参与细胞间的连接,防止细胞的脱落。以往研究显示,恶性肿瘤中E-cadherin表达下降,致肿瘤细胞间黏附作用减弱,易于脱落原发灶而引起肿瘤的浸润和转移。已在非小细胞型肺癌、胃癌、结肠癌等多种恶性肿瘤中发现COX-2高表达,而E-cadherin低表达,二者呈负相关关系,但有关二者在肝癌中的表达水平报道甚少。为了解二者在HCC发生、发展的机制,本文通过观察HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中COX-2和E-cadherin的表达情况以及二者与HCC临床病理特征的关系,初步探讨COX-2和E-cadherin在HCC组织中的相关性。材料和方法经临床手术切除并经病理证实的HCC组织标本64例,其中男38例,女26例；年龄14-74(平均47±9)岁；均为原发性肝细胞肝癌；根据肿瘤组织学分级,高分化20例,中分化25例,低分化19例；按2001年全国肝癌会议,根据肿瘤大小、转移程度及肝功能分级,将肝癌分为三期：Ⅰ期19例；Ⅱ期26例；Ⅲ期19例；肿瘤直径<3cm25例,≥3cm39例；AFP水平≥20 ng/ml 47例,<20ng/ml17例。所有患者术前均未进行任何的抗肿瘤治疗。取20例性别与年龄构成与上述无显著差异并经病理学证实的癌旁组织做对照,另选同期切除肝血管瘤周围正常肝组织9例作为对照。所有标本组织均经过常规10%的甲醛溶液固定,石蜡包埋,4μm厚连续切片。载玻片经泡酸、高温灭菌、多聚赖氨酸涂片处理。采用免疫组化二步法,具体步骤参照试剂盒说明。用PBS代替一抗做阴性对照。以已知COX-2及E-cadherin阳性切片作为阳性对照。结果采用SPSS16.0分析数据,对HCC组织及正常组织中COX-2及E-cadherin的差异性x2检验和Fisher确切概率法,对HCC组织中二者的相关性行spearman相关分析,以a=0.05作为检验水准。结果1、COX-2表达与HCC临床病理因素的关系COX-2阳性染色主要定位于HCC组织的细胞质,呈弥漫分布。COX-2在HCC组织、癌旁组织及正常组织中的阳性表达率分别为75.0%、40.0%、0.0%,COX-2在HCC中的阳性表达显著高于癌旁组织(χ2=8.400,P=0.004),而癌旁组织高于正常肝组织(Fisher确切概率法,P=-0.033),三者比较具有显著性差异(X2=22.873, P<0.001)。HCC组织中COX-2在高中低分化组织中的阳性表达率分别为95.0%、72.0%、68.4%,COX-2在高分化组织中的表达高于中分化组织(χ2=4.021,P=0.045)及低分化组织(χ2=4.674,P=0.031),但三者比较无明显差别(X2=5.625,P=0.060)。HCC组织中COX-2在临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的阳性率分别为52.6%、76.9%、94.7%,三者比较差距有统计学意义(χ2=9.069,P=0.011)。HCC组织中COX-2的表达与性别、年龄、肿瘤大小及AFP水平无关(P>0.05)。2、E-cadherin表达与HCC临床病理因素的关系E-cadherin的阳性染色主要定位于HCC组织的细胞质或细胞膜,呈弥漫分布。E-cadherin在HCC组织、癌旁组织及正常组织中的阳性表达率分别为51.6%、80.0%、88.9%,三者比较差距有统计学意义(X2=8.393,P=0.015)。HCC组织中E-cadherin在高、中、低分化组织中的阳性表达率分别为75.0%、48.0%、31.6%,三者比较具有显著差异(χ2=7.564,P=0.023)。HCC组织中E-cadherin在临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的阳性率分别为73.7%、50.0%、31.6%,三者比较差距有统计学意义(X2=6.786,P=0.034)。HCC组织中E-cadherin的表达与性别、年龄、肿瘤大小及AFP水平无关(P>0.05)3、HCC组织中COX-2表达与E-cadherin表达的相关关系经spearman相关分析得出,HCC组织中COX-2与E-cadherin的表达呈负相关,χ2=7.528 r=—0.343,P=0.006。结论1、COX-2在HCC组织中呈高表达,其阳性表达随着临床分期的升高而逐渐升高,提示COX-2可能在HCC侵袭和转移过程中起一定的作用。2、E-cadherin在HCC组织中呈低表达,其阳性表达随肿瘤恶性程度及临床分期升高而逐渐下降,提示E-cadherin在抑制肿瘤侵袭过程中发挥一定作用。3、相关分析结果显示：HCC组织中COX-2及E-cadherin的表达呈负相关,联合检测该二项指标对判断和预测肝细胞癌的侵袭和转移有一定帮助。