目的：建立本地区本医院的免疫发光化学测定方法的妊娠妇女妊娠各期：妊娠早期(T1)、妊娠中期(T2)、妊娠晚期(T3)特异性血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、血清促甲状腺激素(TSH)的正常参考范围。妇女在妊娠期间,对体内甲状腺及甲状腺激素有着深远的影响。在高水平雌激素的作用下,肝脏合成甲状腺素结合球蛋白(thyroxine binding globulin, TBG)功能增加,同时TBG唾液酸修饰程度增加,导致TBG半衰期延长。当母体处于妊娠早期时,体内血清TBG水平增加近一倍以上,并将一直持续到分娩结束。在碘适量地区,甲状腺体积在整个孕周会增加10%,分泌功能增强用于满足妊娠期机体的需要。这些生理性改变可能会导致早期妊娠甲状腺功能正常的孕妇在妊娠晚期出现低甲状腺素症状。由于体内的雌激素、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin, hCG)分泌大幅度增加以及其他的因素影响,其与甲状腺功能有关的激素会呈现复杂性的变化。血清hCG水平增加,会刺激甲状腺激素分泌增多,反馈抑制TSH分泌,使TSH水平在妊娠早期下降。由于血清中99%以上的三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)其存在方式是与特异的血浆蛋白(主要是TBG)结合存在,因此,为了满足母体代谢和胎儿发育所需足够的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4),母体必须合成更多的甲状腺相关激素。因此为正确判断妊娠期体内的甲状腺激素水平,需建立妊娠特异性甲状腺相关激素正常参考范围。方法：本实验应用美国国家临床生化研究院(NACB)指南推荐的建立TSH正常参考范围的方法,研究组实验对象来自2012年5月至2013年3月期间在山东省立医院就诊进行妊娠常规检查的济南地区妇女。入选标准：(1)无甲状腺疾病家族史、既往史者或其他自身免疫性疾病；(2)无服用影响甲状腺功能的药物(雌激素除外)史；(3)无甲状腺肿大；(4)甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)阴性；(5)无妊娠剧吐、滋养层细胞疾病、先兆子痫；(6)单胎妊娠；(7)抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)阴性者。经过严格筛选得到妊娠(4周～40周)妇女411名。对照组研究对象来自于山东省立医院健康查体中心的年龄为20-45岁之间的健康非妊娠妇女及部分志愿者,入选标准：(1)无不孕病史；(2)月经周期正常；(3)无甲状腺疾病家族史、既往史者或其他自身免疫性疾病；(4)无服用影响甲状腺功能的药物史；(5)无甲状腺肿大；(6)甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)阴性；(7)抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)阴性者。经过严格筛选得到对照组研究对象60人。将411例研究组患者按所处妊娠时期的不同进行分层,然后行统计学分析。次日进行体格检查后留取空腹静脉血约5ml装入一支促凝管并放入-70℃冰箱用于集中检测。血清用于测定促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb), FT3、FT4、TSH、TPOAb、TGAb、TRAb检测方法为电化学发光法,试剂由美国罗氏诊断产品有限公司生产(Roche, Cobas6000-e601)。TSH采用直接电化学免疫发光法,灵敏度＜0.001mIU/L,测定目的为超敏TSH。FT3、FT4、TSH、TPOAb、TGAb、TRAb指标批内变异系数(CI)均小于10%。检测血清FT3、FT4、TSH水平,分成早期妊娠、中期妊娠、晚期妊娠3组,每组＞120人。以各指标的第2.5至97.5百分数作为可信区间。以上各组所得到的全部数据分组输入EXCEL表格,应用SPSS17.0版本进行统计学分析。首先对一般指标年龄、孕周进行正态分布检验,符合正态分布,用X±S表示。FT3、FT4符合正态分布,每组数据用X±S表示,各组间两两比较用单因素方差分析(one-way ANOVA); TSH呈非正态分布,每组数据用中位数进行表示,选95%为可信区间及参考范围,即P2.5为下限,P97.5为上限,各组间两两比较采用非参数检验(秩和检验)。P<0.05具有统计学意义。结果：血清FT3在妊娠早期、妊娠中期、妊娠晚期的参考范围分别为：3.33-5.78pmol/L,3.07-5.52pmol/L,2.91-5.46pmol/L.血清FT4在妊娠早期、妊娠中期、妊娠晚期的参考范围分别为：12.60～18.94pmol/L,8.74～17.23pmol/L,8.64～17.21pmol/L。血清TSH在妊娠早期、妊娠中期、妊娠晚期的参考范围为：0.27～4.27mIU/L,0.53～4.75mIU/L,0.76～4.59mIU/L。妊娠后血清FT3水平低于非妊娠正常对照组水平,妊娠早期FT3水平比非妊娠期降低1.6%；妊娠早期血清FT4水平高于非妊娠期水平,较非妊娠水平增高5%；妊娠早期血清TSH水平较非妊娠期水平下降,妊娠早期血清TSH水平较非妊娠期水平降低43%。结论：妊娠妇女体内甲状腺相关激素受本身内分泌变化的影响发生变化,与非妊娠时期具有较大的差异性。本研究结果与其他地区的妊娠特异性甲状腺功能正常参考范围相比有较大差异,具体结果见表4。如来自上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院的范建霞课题组提出血清TSH在妊娠早期、妊娠中期、妊娠晚期参考上限分别为5.17mIU/L、5.22mIU/L、6.84mIU/L,分别比本实验所得妊娠各期TSH参考上限高21%(0.90mIU/L)、9%(0.47mIU/L)、50%(2.25mIU/L),差异较大。如来自中国医科大学附属第一医院的薛海波课题组[24]提出血清TSH在妊娠早期、妊娠中期、妊娠晚期参考上限分别为3.93mIU/L、3.50mIU/L、3.85mIU/L,分别比本实验所得妊娠各期TSH参考上限低2%(0.08mIU/L).26%(1.25mIU/L)、16%(0.74mIU/L)。考虑其原因为：生活习惯不同、饮食摄入碘量不同、实验所用试剂不同。本研究所得的妊娠特异性甲状腺功能正常参考范围与美国甲状腺学会(ATA)指南及我国中华医学会妊娠和产后甲状腺疾病诊治指南推荐的参考范围差异性较大。本实验所得血清TSH妊娠早期上限比ATA推荐上限高1.77mIU/L,升高70%；妊娠中期上限比ATA推荐上限高1.75mIU/L,升高60%；妊娠晚期上限比ATA推荐上限高1.59mIU/L,升高53%。因此,建议每个地区每个实验室按照美国临床生化研究院(NACB)及中华医学会妊娠和产后甲状腺疾病诊治所推荐的筛选方法制定当地正常的妊娠妇女特异性甲状腺功能参考范围。这有利于妊娠期甲状腺功能异常疾病的正确诊断和正确治疗。