目的：活化的肝星状细胞(HSCs)是肝纤维发生过程中的关键细胞。诱导活化的HSCs细胞凋亡有助于逆转肝纤维化。静止期的HSCs细胞质中含有丰富的脂滴。Plin5是脂滴表面的包被蛋白，在维持哺乳动物细胞的脂质稳态中起着关键作用。然而，目前对HSCs激活状态下Plin5的作用机制知之甚少。在本报告中，体外培养大鼠原代HSCs(rHSC-primary)，探索Plin5在肝纤维化中的作用和机制。采用293T细胞包装慢病毒系统，产生病毒颗粒(pFLRu-PLIN5)，将其转导到培养的大鼠原代HSCs中用于实验。探讨Plin5对活化的HSCs增殖的影响以及AMPK是否参与Plin5调控细胞凋亡、自噬和线粒体功能障碍，为Plin5诱导活化的HSCs细胞凋亡提供了新机制，为治疗肝纤维化提供新的靶点。　　方法：(1)分别从健康大鼠、C57BL/6J小鼠和NAFLD模型C57BL/6J小鼠中分离肝脏组织、内脏脂肪和原代HSCs;体外培养细胞系大鼠HSC-T6和小鼠HSC-GRX;RT-PCR和免疫荧光实验检测各组织、细胞中Plin5、Plin1、Plin2、Plin3和HIG2水平。　　(2)体外培养转导pFLRu-PLIN5的rHSC-primary。荧光显微镜和MTS法观察其增殖状态;Western blot测定α-SMA和胶原蛋白、测定Cyclin D1和p21水平。　　(4)用或不用ICE-蛋白酶抑制剂处理Plin5过表达的rHSC-primary，Western blot检测Bcl-2和Bax、caspase级联酶水平和caspase-3活性。　　(5)使用不同浓度AICAR处理rHSC-primary24小时。Western blot检测AMPK的磷酸化、各组自噬相关基因ULK1和LC3的磷酸化水平。　　(6)分别用化合物C和氯喹预处理转导pFLRu-PLIN5的rHSC-primary。MTS测定增殖细胞情况;Western blot评估caspase-3活性、AMPK的磷酸化、Bcl-2和Bax、Cyclin D1和p21水平。　　(7)pEGFP-LC3与pFLRu-PLIN5共转导于rHSC-primary。在荧光显微镜下观察LC3荧光斑点的百分比。　　(8)用或不用丙酮酸甲酯、ICE-样蛋白酶抑制剂预处理pFLRu-PLIN5转导的rHSC-primary。RT-PCR检测PGC-1α水平;ATP测定试剂盒测定ATP水平;Western blot分析Caspase-3活性、AMPK水平、Bcl-2和Bax、Cyclin D1和p21水平。　　结果：(1)Plin5mRNA水平在内脏脂肪、静息期HSCs、健康肝脏、D7-HSCs依次呈下降趋势(P＜0.05)。与静息状态HSCs相比，活化HSCs中Plin2水平下降超过50％(P＜0.05)。而Plin1、Plin3和HIG2的mRNA水平在HSCs的两种状态下无明显差异（P＞0.05）。与正常饮食组小鼠相比，高脂饮食喂养组的小鼠HSCs的Plin5和Plin2分别下降90％和40％（P＜0.05）。　　(2)镜下和MTS法观察发现Plin5过表达的rHSC-primary活性降低、α-SMA和胶原蛋白的产生减少、Cyclin D1蛋白表达下降，p21蛋白表达升高(P＜0.05)，细胞增殖受到抑制。　　(3)rHSC-primary中Plin5过表达，下调Bcl-2，上调Bax，增加PARP、caspase-3和caspase-9水平(P＜0.05)，其变化可被caspase蛋白酶抑制剂逆转（P＜0.05）。　　(4)Plin5过表达的rHSC-primary和经过AICAR处理的rHSC-primary，AMPK磷酸化水平增加，AICAR剂量依赖性地增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比率（P＜0.05）。　　(5)化合物C预处理转导pFLRu-PLIN5的rHSC-primary时发现，化合物C消除了Plin5过表达诱导的HSCs细胞周期停滞和细胞凋亡作用（P＜0.05）。　　(6)rHSC-primary转导pFLRu-PLIN5慢病毒后，p-AMPK、p-ULK1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平明显增加（P＜0.05）。这些作用结果均可以被氯喹消除（P＜0.05）。　　(7)pFLRu-PLIN5转导的rHSC-primary经过pEGFP-LC3转导后，LC3亮斑增加（P＜0.05）。　　(8)Plin5过表达的rHSC-primary，p-AMPK、p21水平均增加，线粒体功能的调节因子PGC-1αmRNA、ATP、Cyclin D1与Bcl-2水平下降（P＜0.05）。而这些作用可以在补充ATP水平后恢复（P＜0.05）。　　结论：Plin5损伤线粒体的生物合成，降低ATP水平，激活AMPK信号通路，诱导HSCs的凋亡。