【摘 要】
：
细菌体内存在某些免疫刺激序列（由胞嘧啶、鸟嘌呤及其连接胞嘧啶和鸟嘌呤两者的磷酸二酯键构成的二核苷酸）,可作为一种模拟细菌、病毒入侵的危险信号被免疫系统所识别,从而直接刺激B淋巴细胞、巨噬细胞和树突状细胞的增殖分化,上调免疫刺激分子的表达,调节免疫反应,诱导IL-6、IL-12、IFN-γ和TNF-α等细胞因子的分泌。此外,免疫刺激序列还可以间接活化自然杀伤细胞和T淋巴细胞,产生Th1型的细胞免疫,
论文部分内容阅读
细菌体内存在某些免疫刺激序列（由胞嘧啶、鸟嘌呤及其连接胞嘧啶和鸟嘌呤两者的磷酸二酯键构成的二核苷酸）,可作为一种模拟细菌、病毒入侵的危险信号被免疫系统所识别,从而直接刺激B淋巴细胞、巨噬细胞和树突状细胞的增殖分化,上调免疫刺激分子的表达,调节免疫反应,诱导IL-6、IL-12、IFN-γ和TNF-α等细胞因子的分泌。此外,免疫刺激序列还可以间接活化自然杀伤细胞和T淋巴细胞,产生Th1型的细胞免疫,诱导免疫系统产生更加强烈而均衡的免疫反应。并且免疫刺激序列具有高效且毒副作用低等优点,可作为一种新型的核酸佐剂,是新型免疫增强剂的研究热点。本试验设计了对畜禽具有免疫刺激活性的核苷酸序列,并将其克隆到质粒pc DNA3.0上,构建了含有不同拷贝数（分别为15、20、30、40、45、50和65）的核苷酸序列重组质粒,分别命名为pc DNA-1、pc DNA-2、pc DNA-3、pc DNA-4、pc DNA-5、pc DNA-6和pc DNA-7。为了验证构建的重组质粒的遗传稳定性,在含氨苄青霉素抗性的LB固体平板上对携带重组质粒的转化菌进行连续30代传代培养,通过菌落PCR、酶切鉴定及目的基因序列测定等方法对重组质粒遗传稳定性进行检测。结果表明,在30代内,7种重组质粒插入的核苷酸片段长度和序列均能稳定遗传。为了探究构建的重组质粒是否具有免疫刺激作用,分别用不同剂量（2.5μg、5.0μg和7.5μg）重组质粒pc DNA-1、pc DNA-2、pc DNA-3、pc DNA-4、pc DNA-5、pc DNA-6和pc DNA-7刺激鸡外周血淋巴细胞,并设立Con A刺激的阳性对照组和无刺激物的阴性对照组,用体外淋巴细胞转化的实验方法检测上述实验组外周血淋巴细胞的增殖能力和代谢强度。结果显示,重组质粒pc DNA-1、pc DNA-2、pc DNA-3、pc DNA-4、pc DNA-5、pc DNA-6和pc DNA-7对外周血淋巴细胞均有不同程度的刺激效果,同种质粒在7.5μg的刺激效果最强。各重组质粒在同等刺激量下,pc DNA-6和pc DNA-7的刺激指数SI值均高于其他重组质粒组,且在7.5μg的刺激量时,pc DNA-6和pc DNA-7的刺激指数均超过5.0。本研究将构建的7种重组质粒pc DNA-1、pc DNA-2、pc DNA-3、pc DNA-4、pc DNA-5、pc DNA-6和pc DNA-7分别与猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗混合后通过皮下注射对SPF级的BALB/c小鼠进行免疫,免疫后第7、14、28和35天进行小鼠断尾采血,分离血清,用ELISA的方法检测血清中cap蛋白的抗体水平,同时设立疫苗单独免疫组及生理盐水空白对照组。结果显示,与疫苗单独免疫组相比,各重组质粒与猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗混合免疫组的抗体水平均比疫苗单独免疫组高,且重组质粒pc DNA-6和pc DNA-7组均高于其他重组质粒组。表明重组质粒在猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗基础上能提高小鼠体内猪圆环2型病毒cap蛋白的抗体水平。为了探究重组质粒对禽流感灭活疫苗使用中的增强作用,本研究将重组质粒pc DNA-6和pc DNA-7分别和禽流感灭活疫苗同时免疫20日龄健康雏鸡,免疫后的第7、14、28和35天分别采血,分离血清,测定血清中禽流感的HI效价,同时设立疫苗单独免疫组及生理盐水空白对照组。结果显示,重组质粒pc DNA-6和pc DNA-7与禽流感灭活疫苗免疫组的抗体HI效价均高于疫苗单独免疫组,且重组质粒pc DNA-6组高于pc DNA-7组,pc DNA-6组HI效价比疫苗对照组高1.5log2,表明构建的重组质粒pc DNA-6、pc DNA-7与禽流感灭活疫苗联合使用能显著提高雏鸡体内禽流感的抗体水平。综上,本研究成功构建了7种携带免疫增强作用的核苷酸序列的重组质粒,并且验证了其具有良好的遗传稳定性。构建的7组重组质粒对鸡外周血淋巴细胞均具有免疫刺激作用,其分别配合猪圆环病毒2型杆状病毒载体疫苗、禽流感灭活疫苗使用均能提高抗体水平。其中pc DNA-6的免疫增强效果最为突出,故其可作为核酸免疫增强剂应用于疫苗生产中,为核酸免疫增强剂的研发与应用奠定了基础。
其他文献
本文结合上海市大数据中心数据管理需求，从构建公共数据标签管理体系的角度，描述标签分类、构建、管理、共享以及服务输出的建设思路。公共数据标签管理体系的建立是统一集中管理和组织公共数据标签的有效方式，基于业务需求推动公共数据标签的分类和构建，进而实现对公共数据标签的管理和共享。同时，介绍了民政领域依托标签开展的各类应用。
量子群是李群和李代数经过形变后得到的一类特殊的Hopf代数。它起源于理论物理,最早是由Drinfeld [6]和.Jimbo[16]分别提出来的。1988年,Faddeev, Reshetikhin和Takhtajan利用R矩阵给出了量子群的另外一种实现方式[7],并说明量子行列式是A（Mat。（n））的中心。随后Hashimoto, Hayashi, Taft和Towber将行列式的很多性质推广
本文主要针对美妆博主如何影响大学生美妆产品消费问题进行了相关研究,利用多重响应分析法、因果逐步回归法,分析美妆博主营销模式对大学生美妆消费的影响情况。首先采用多重响应分析的方法,先了解大学生关注美妆博主的主要原因,再利用大学生消费美妆产品受美妆博主的影响,然后从每月的美妆产品总消费的情况,利用方差分析研究平均每月用在美妆博主推荐的化妆品消费和在每天关注美妆博主花费的不同时间长短的差异情况。最后采用
猪圆环病毒3型（Porcine Circovirus Type 3,PCV3）属于圆环病毒科（Circovirus）,圆环病毒属（Circovirus）,可引起猪繁殖障碍、皮炎肾病综合征及心脏多系统炎症等疾病。2015年,美国堪萨斯州立大学Palinski等从北卡罗来纳州的一个爆发PDNS（皮炎和肾病综合征）的猪场中检测到了一种新型猪圆环病毒,并且通过宏基因组测序和遗传进化分析将其命名为猪圆环病毒
表示论在抽象代数中有着广泛的应用.比如在群论、结合代数及李代数研究中,它主要是将代数结构中的元素“表示”成向量空间上的线性变换,来研究代数结构的性质.特别地,仿射李代数的顶点表示在数学和物理领域都有非常重要的意义和应用.1978年,Lepowsky和Wilson[36]在研究仿射李代数（1）1时首先给出它的主实现顶点表示;随后在1981年,他们又和Kac及Kazhdan合作推广了上述工作,得到仿射
纤维增强复合材料（Fiber Reinforced Polymer，简称FRP）加固钢筋混凝土（RC）结构件的疲劳性能及其耐久性是国内外土木建筑领域的一个前沿课题。对于公路桥梁的FRP加固RC结构，其承受的活载主要是车辆随机载荷。虽然我国在高速公路上采取了限制超载的措施，但超载现象仍然普遍存在。超载尤其是“过载”对桥梁结构造成的损害是有目共睹的，但“过载”对FRP加固RC结构件疲劳损伤的影响机制尚
近年来,乡村旅游业已经成为横跨农村一二三产业的新兴产业。增城区积极响应国家的政策,热情投入到乡村旅游的建设中,其发展已具有一定的产业规模和基础,呈现出亮点明显、综合效应强等优势,但仍处于初级阶段,面临着诸多的问题函待解决。可见,研究增城区乡村旅游游客意愿与游客满意度格外重要。由此,本文以增城区主要乡村旅游点的游客为调研对象,运用问卷调查法进行实地调研,最终收集了297份有效样本。在此基础上,运用实
长期以来,国家的建设和发展都是以提高社会生产力、增加社会财富、摆脱贫困为主要目标。我国拥有着十分巨大的人口数量,约占世界人口的25%,因此我国的贫困问题不仅仅自身的问题,也是整个世界的问题,故立足于这一视角开看待中国脱贫工作,而如何将脱贫工作落到实处的问题与人类福祉息息相关。贫困问题因国家不同而各有不同。笔者将以广东恩平为研究对象,本地区存在着严峻的贫困问题,具有贫困人口数量大、经济落后的特点。在
如今,抗生素作为抑菌药物被广泛应用于我国养殖业,养殖过程中的多种细菌性疾病大多是使用抗生素进行治疗,滥用抗生素的情况也同时存在。随着健康养殖和食品安全越来越受到人们的关注,“减抗,替抗”成为养殖业及相关行业的发展趋势,因此,寻找新的、安全有效的抗生素替代物对养殖行业的发展具有重要意义。而解淀粉芽孢杆菌作为一种益生菌,能够产生多种抗菌活性成分,其产生的抗菌活性成分具有替代抗生素的潜能。本研究从土壤中