【摘 要】
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目的:探讨内源性烟酰胺磷酸核糖转移酶(endogenous Nampt)在糖尿病模型小鼠肾小球纤维化(glomerular fibrosis,GF)中对波形蛋白(Vimentin,VIM)表达的影响。方法:应用糖尿病动
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目的:探讨内源性烟酰胺磷酸核糖转移酶(endogenous Nampt)在糖尿病模型小鼠肾小球纤维化(glomerular fibrosis,GF)中对波形蛋白(Vimentin,VIM)表达的影响。方法:应用糖尿病动物模型,制备肾脏组织切片,应用免疫共聚焦和免疫荧光进行蛋白表达的定位分析,分别评价肾脏肾小球细胞中Nampt和VIM的表达情况;根据高浓度葡萄糖(200 mmol/L)对肾小球系膜HBZY-1细胞氧化应激的严重程度进行分组(1组(200 mmol/L高糖组)、2组(200 mmol/L高糖组+FK866组)、3组(200 mmol/L高糖组+NMN组)、4组(200 mmol/L高糖组+FK866+NMN组);对照组分别为:5组(0.56mmol/L葡萄糖)及6组(0.56 mmol/L葡萄糖+FK866)和7组(0.56 mmol/L葡萄糖+NMN)),通过免疫荧光方法检测肾小球系膜细胞中Nampt和NF-κB、Sirt1表达,分析它们的相互关系,并通过免疫印迹方法对各相关蛋白的表达进一步再确认,研究内源性Nampt与肾小球前纤维化因子VIM表达的作用机制。结果:糖尿病组肾小球呈明显萎缩,严重糖尿病组小鼠的肾小球细胞内随着Nampt表达的增加,VIM表达也明显增加;随着时间的延长(0-5d)细胞内Nampt表达增加,同时NF-κB的表达也随之升高,而细胞内的Sirt1表达却明显减少(p﹤0.01)。随着Nampt表达的减少,VIM呈现表达明显减少趋势,NMN的干预也起到了相同的作用。结论:在肾脏纤维化过程中,Nampt通过NF-κB和Sirt1的相互作用可以调控VIM的表达,从而影响肾脏的炎症纤维化进程。
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