1．猪胰、十二指肠及肾联合移植胰液膀胱引流的模型建立和实验 研究目的 建立胰、十二指肠及肾联合移植（simultaneouskidney-pancreaticoduodenal transplantation，SPKT）胰液膀胱引流的大动物模型，并对其移植早期自然排斥反应的监测指标和组织病理改变进行研究。方法 选用30只杂种猪作SPKT的供受体，供体手术采用腹主动脉插管，灌注前经腹主动脉放血200ml备用，用0-4℃高渗枸橼酸盐腺嘌吟（hyperosmotic citrate adenine，HCA）溶液原位灌注，灌注高度为80cm水柱。以流出液变清亮，胰、十一指肠及肾花白为准，需灌注液的300ml。整块切取带腹主动脉、下腔静脉、门静脉的胰、十二指肠、脾、双肾及输尿管，保存于0-4℃的HCA溶液中，将腹主动脉修剪成带腹腔动脉、肠系膜上动脉及左肾动脉的血管段，根据门静脉远端的直径将其与左肾静脉或带有腔静脉片的左肾静脉行端端吻合。甲硝唑溶液冲洗十二指肠，关闭其上下端。受体手术进腹后先切除全胰，游离肾动脉以下腹主动脉，仔细结扎腰动脉及周围淋巴管，分离下腔静脉远端；结扎所有属支。于受体腹主动脉前壁剪一口径与供移植物腹主动脉口径相似的椭圆形开口，将移植物腹主动脉段和门静脉分别与受体腹主动脉及下腔静脉行端侧吻合。十二指肠与受体膀胱行侧侧双层吻合，输尿管置管外引流。同时监测受体的空腹血糖、尿淀粉酶和移植肾尿量，并观察移植物在未作预防及抗排斥处理情况下的病理改变。结果 15只受体中死于内环境紊乱及吻合口出血各1只，其余13只获得移植成功，平均存活9.5±2.7天。其中有2只受体猪因尿淀 南京医科大睾博士学位论文 粉酶下降明显，移植肾尿量急骤下降及血糖显著升高分别于术后第 7、9天活杀，均发现移植物肿胀，颜色发暗，有片状坏死；经病 理证实为急性排斥，其余动物尸检均证实为急性排斥反应致移植物 破坏。术后存活动物临床大致过程为3．4天肠蠕动恢复，有排便，t 45天开始进食，7习天出现精神萎糜。乏力、厌食，腹部扣及包 块，体重急骤下降，l－2天后动物死亡。尿淀粉酶的改变明显先于 空腹血糖和移植肾尿量的变化；移植肾排斥的严重程度显著高于胰 腺和十二指肠。 结论 这种建立大动物猪SPKT模型的方法是可行的。在胰液膀腕 弓】流的SPKT动物实验中，尿淀粉酶下降是移植物急性排斥的早期 指标；移植肾排斥的病理变化最为显著。 2．胰、十H指肠及肾鹏切取、修剪和保存的实验研究 目的 探讨同种异体胰、十二指肠及肾联合移植尸体供移植物的获巴 取、修剪和保存方法。 方法 采用原位腹主动脉插管、低温灌n HCA或 UW（Universityof Wisconsin）t、快速整块切取全胰、十二指肠、脾、双肾及榆 尿管、腹主动脉和下腔静脉。体外修剪成适用于临床移植的胰、十 二指肠及肾移植物：在右肾动脉和肠系膜上动脉开口之间横断腹主 动脉，将带有腹主动脉和下腔静脉的双肾分开；肾脏修剪按肾移植 常规进行。胰、十二指肠修剪时将腹主动脉修剪成带有腹腔动脉和 肠系膜上动脉开口的主动脉片（C。幻片），保留十二指肠6－scm。 后 2次采用 UW液灌注和保存；对2例供胰进行了保存研究；4只 供肾应用于临床移植。 结果6例尸体供移植物，热缺血时间平均为4分50秒，切取时 间为 18分 20秒。体外修剪平均用时 2。J、时。后 2次采用 UW液 灌注和保存的4只供肾用于肾移植，受体肾功能恢复均较好；2只 供胰 UW液保存 18小时后，光镜下胰腺小叶结构清晰，可见小叶1 菱 南京医科大学博士学位论文 间导管，胰腺腺泡完整，细胞界限清晰，细胞核呈圆形或椭圆形、 核膜清晰可见，核仁小、胞浆淡染、丰富。24小时腺泡细胞有轻 度变性，细胞间隙不清，细胞核浓染，结构不清；胰腺小叶内可见5 胰岛细胞呈巢状，胞浆、血窦丰富。保存18小时电镜下观察胰腺 外分泌细胞完好无损，外分泌腺管腔边界清楚、绒毛完整，内质网 丰富、境界清，细胞核及线粒体形态正常。24小时有少量胰腺外 分泌细胞出现内质网轻度扩张、膜性结构有自溶现象，线粒体肿胀、 略模糊不清，细胞核畸变、固缩及异染色质分布异常等超微结构的 改变。胰岛细胞超微结构未见明显异常。 结论 此方法适合于尸体供胰、十二指肠及肾的获取、修剪和保存， 应