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目的:探讨脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)后运用坏死性凋亡抑制剂Nce-1(Necrostatin-1)是否对于脊髓损伤后的内质网应激(ERS)有减轻作用,进一步补充Nec-1对于脊髓损伤的保护作用机制。为脊髓损伤后的治疗提供新的思路及治疗方向。方法:采用60只雄性,SPF级SD大鼠,体重0.25到0.30 kg之间。将这些大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组,Ⅰ组)、假手术+Necrostatin-1治疗组(sham+Nec-1 组,Ⅱ组)、SCI+Necrostatin-1 治疗组(SCI+Nec-1 组,III组)、SCI+局部注射DMSO组(SCI组,Ⅳ组)。各组又分为伤后6h、12h和24h三个亚组,6小时组3只大鼠,12小时组6只大鼠,24小时组6只大鼠。采用改良的Allen法制作大鼠脊髓损伤模型。Sham组不作任何处理,sham+Nec-1组造模前30分钟硬膜下局部注射2ul Nec-1(25 μ g/μ l),SCI+Nec-1组造模前30分钟局部注射2ul Nec-1(25 μg/μ1),SCI组相同时间点注射等量的DMSO。各手术组大鼠术后注射50000U青霉素预防感染。按照亚组时间点取组织。采用rt-qPCR技术检测ERS相关的CHOP mRNA、GRP78 mRNA表达水平,采用反转录PCR检测ERS相关的XBP1 mRNA表达含量。采用蛋白印记(WB)技术检测ERS相关CHOP、GRP78和XBP1蛋白表达含量。采用免疫荧光(IF)技术对蛋白印记检测蛋白进行定位。采用电子显微镜(EM)技术观察脊髓损伤后的内质网及线粒体超微结构变化。结果:PCR 结果显示:ERS 相关 CHOP mRNA、GRP78 mRNA、XBP1 mRNA 在6h和12h的表达水平SCI+Nec-1组和SCI组比较,SCI+Nec-1组表达明显下降(P<0.05),而sham组和sham+Nec-1组表达无差异,且均低水平表达。WB结果显示:三个ERS相关蛋白在损伤后12h和24h在SCI+Nec-1组蛋白表达水平明显比SCI组低(P<0.05),而sham组和sham+Nec-1组表达无差异,且均低水平表达。IF结果显示,WB所检测的三个蛋白均在神经元细胞质中高表达。EM结果显示在SCI+Nec-1组和SCI组均有不同程度的内质网超微结构变化,但在SCI组内质网严重液泡样变,内质网肿胀呈球形,内质网表面核糖体大量脱落,内质网膜轮廓不清晰。而SCI+Nec-I组内质网仅部分肿胀,内质网膜轮廓清晰,核糖体少量脱落。且线粒体在SCI+Nec-1组和SCI组均有不同程度的损伤,但在SCI组线粒体严重空泡样变,线粒体内脊消失,双层膜结构破裂。而SCI+Nec-1组线粒体仅部分内脊消失,线粒体轮廓清晰,双层膜结构未见明显破裂。结论:脊髓损伤后应用坏死性凋亡抑制剂Necrostatin-1可以减轻脊髓损伤后内质网应激,减轻内质网和线粒体超微结构损伤。为脊髓损伤的治疗提供新的方向。