17株芽孢杆菌产酶特性及益生特性的研究

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益生芽孢杆菌作为饲料添加剂应用于畜牧养殖与水产养殖已相当广泛,关于芽孢杆菌益生作用机制的研究主要集中在调节肠道微生物平衡和对致病菌的拮抗作用上,而对促进饲料转化方面的研究较少。本课题对17株芽孢杆菌产酶特性以及部分医生特性展开了研究。本文选择了17株芽孢杆菌,首先定性检测其产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶的能力,发现除少数菌株以外,多数益生芽孢杆菌具有产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶能力,仅有5株菌有明显的产脂肪酶能力。其次,定量检测了菌株在菜粕、豆粕、麸皮、棉粕四种常用的饲料原料固体培养条件下产蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶能力,得到综合产酶能力较佳的Js-1、NN、N-2菌株。进一步研究3株菌对于玉米-菜粕、玉米-豆粕、玉米-麸皮、玉米-棉粕四种组合饲料的消化效果。研究发现,3株芽孢杆菌对饲料纤维素的消化均不明显,处理组中效果最明显的玉米-菜粕组,纤维素含量下降也只有0.8%(Js-1);菌株对半纤维素消化降解明显,其中效果最好的是玉米-麸皮组,半纤维素消化率分别下降23.5%(Js-1)、18.7%(N-2)、10.0%(NN),对于玉米-棉粕组合饲料中半纤维素也有较好的消化效果,半纤维素消化率为14.6%;芽孢杆菌作用后还原糖含量增加显著,增量在6.1mg/g以上,其中3株菌均对于玉米-麸皮组合饲料具有最好的处理效果,还原糖分别增加23.7mg/g(Js-1)、22.5mg/g(N-2)、22.3mg/g(NN);芽孢杆菌对组合饲料蛋白质分解亦有明显效果,处理后游离氨基酸浓度明显上升,游离氨基酸增加量折算成组合饲料蛋白消化率,结果显示至少有4.1mg/g的蛋白质降解成氨基酸,Js-1处理组消化蛋白量在7.7mg/g以上,N-2对玉米-豆粕、玉米-麸皮处理样中消化蛋白分别为11.0mg/g、11.4mg/g,而NN处理组中消化蛋白量均低于5.9mg/g,这说明其中2株枯草芽孢杆菌的效果明显优于地衣芽孢杆菌NN。综上所述,益生芽孢杆菌可以促进饲料的消化,芽孢杆菌对饲料的消化效果与饲料组合有关,也与菌株本身的产酶特性有关。选择了液体培养条件下产蛋白酶较高的N-2、N-5、YCB菌株,研究了菌株培养粗酶液对菜籽皮、豆粕、麸皮、酒糟直接酶解效果,结果显示处理后氨基酸浓度上升,其中3株菌粗酶液均对麸皮中蛋白质有较好的酶解效果,游离氨基酸增加0.098mg/g以上,占饲料原料中总蛋白的20.8%,3株菌之间无明显差异。研究了17株芽孢杆菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的拮抗性,结果显示,多数菌株对金黄色葡萄球菌有显著的拮抗作用,只有4株菌对大肠杆菌有拮抗作用。研究了17株菌对胆酸盐的耐受性,结果显示多数菌株耐胆酸盐能力较差,仅能耐受0.05%的胆酸盐,Js-1、N-2能够耐受0.1%的胆酸盐。研究了诱导产芽孢后Js-1、N-2、YCB菌株对于pH2.0盐酸的耐受性,结果显示3株菌均具有很好的耐酸性,pH2.0盐酸溶液处理30min,菌体存活率均在90.0%以上。
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