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目的本实验通过体外研究,从炎症——胰岛素信号转导通路——胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)这一新视角入手,探讨苦瓜总皂苷对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取量和炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)m RNA水平和蛋白分泌的影响,从炎症角度探讨苦瓜总皂苷改善胰岛素抵抗的机制。方法1、MTT法观察苦瓜总皂苷对3T3-L1前体脂肪细胞增殖活力的影响并筛选药物浓度。2、诱导液分步诱导前体脂肪细胞成脂,油红“O”染色法鉴定脂肪细胞是否形成。3、用地塞米松处理脂肪细胞来建立胰岛素抵抗模型。4、苦瓜总皂苷干预胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞24h后,用葡萄糖氧化酶法检测观察各组培养液中葡萄糖的含量变化。5、荧光定量PCR法检测苦瓜总皂苷对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞TNF-α和IL-6的m RNA的影响。6、ELISA法检测苦瓜总皂苷对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞TNF-α和IL-6的影响。结果1、选定用于实验的苦瓜总皂苷的作用时间为24h,浓度为苦瓜高剂量组(5mg/m L)、苦瓜低剂量组(2.5mg/m L)。2、诱导分化3T3-L1细胞12d形成成熟细胞。3、地塞米松干预脂肪细胞48h后,胰岛素抵抗模型建立。4、与模型组相比,苦瓜总皂苷干预3T3-L1胰岛素抵抗脂肪细胞后,葡萄糖摄取量显著增高(P<0.01)。5、与模型组相比,苦瓜总皂苷干预3T3-L1胰岛素抵抗脂肪细胞后,TNF-α与IL-6分泌m RNA表达量显著降低(P<0.01),TNF-α与IL-6蛋白分泌量显著下降(P<0.01)。结论1、苦瓜总皂苷能够显著提高胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取量,同时对正常3T3-L1脂肪细胞的糖含量无显著影响。2、苦瓜总皂苷可以明显降低胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞异常的TNF-α、IL-6的m RNA水平和蛋白分泌水平。