不同处理对远志种子萌发及愈伤组织诱导的研究

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远志为传统大宗中药,几年来随着与该品种有关的新药效发掘研究以及新药开发研究,远志的需求量逐年递增。远志属药用植物多处于野生状态,生长速度缓慢,植株矮小,导致产量很低。远志的种子很小,萌发前期发育缓慢且难以采收。远志栽培技术复杂,土培的远志种苗生长速度慢,对温度湿度很敏感,需要严格的田间管理。这些问题都亟待解决,所以近年来,远志的人工栽培技术倍受重视。本研究以远志种子为基础,以期为远志再生体系的形成和大规模人工种植提供更加优化的方式方法。
  本研究以远志种子为实验材料,测定了远志种子的千粒质量、净度、含水量及吸水率,分别采用不同的生长调节剂、培养温度和浸种温度的处理,观察种子发芽势、发芽率、染菌率、发芽指数、活力指数,并对远志幼苗的根长及株高变化以周为周期进行记录。
  在上述研究基础上,对远志种子进行重金属胁迫处理,观察重金属胁迫下远志种子的发芽势、发芽率、染菌率、发芽指数、活力指数。并每周记录远志幼苗的根长及株高。
  为建立远志的再生体系,首先培养远志无菌苗,随后研究外植体部位、培养基种类、激素配比、培养温度、光照时间对远志愈伤组织诱导和增殖的影响,最后考察不同激素配比对远志愈伤组织分化成不定芽和根的影响。
  取得如下研究成果:
  1、远志种子净度约78.11%,千粒质量为(3.09±0.03)g,含水量约8.9%,吸水率为自然风干种子质量的1.96倍。
  2、综合了五项指标:发芽势、发芽率、染菌率、发芽指数和活力指数,本文研究的7种生长调节剂,对远志种子的萌发和生长的总体效果为GA3?IBA?SA?IAA?KT?NAA?6-BA。经过GA3溶液处理后的远志幼苗根、茎都明显变长,优于其他生长调节剂,其中以质量浓度为150mg·L-1的GA3溶液处理效果最好,远志种子的发芽率,活力指数都是最高的,且染菌率为0。
  3、三种重金属元素胁迫对远志种子的萌发总体效果为Zn2+?Cu2+?Co2+。但除了160mg·L-1以下的Zn2+溶液,上述重金属胁迫对远志种子萌发的影响全部都是抑制作用。Co2+的毒害作用最大,随着实验时间的推进,远志幼苗逐渐枯黄死亡。
  4、以远志无菌苗的根部为外植体,MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1培养基,25℃,12h光照培养条件下,远志愈伤组织诱导率最高,愈伤组织呈浅黄绿色,水润紧致,长势良好。远志愈伤组织适合在MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1培养基上增殖,培养条件为28℃,16小时光照。长芽培养基为MS+KT0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1NAA,生根培养基为MS+IBA0.4mg·L-1+NAA0.2mg·L-1。
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