刺山柑提取物对试验鼠抗炎镇痛、微循环和实验性关节炎的作用

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本研究以新疆吐鲁番野生刺山柑果实为原料,通过正交设计和树脂吸附-洗提试验,优化刺山柑中黄酮类物质的提取方法(试验一),并将提取物制成试验用生药(配制成1g生药/mL供试品,其总黄酮含量为2.4%(干物质计)),以研究其对试验鼠抗炎镇痛(试验二)、微循环、(试验三)、免疫调节(试验四)和佐剂性关节炎的作用(试验五)。在试验二和试验三,将正常小鼠分为5组,即生理盐水组、低剂量刺山柑提取物(CSE)组(1.25mg/10g体重/天)、中剂量CSE组(2.5mg/10g体重/天)、高剂量CSE组(5.0mg/10g体重/天)和阿司匹林(2.5mg/10g体重/天)组,连续灌胃7天后进行试验。结果表明,与生理盐水组比较,各组小鼠对醋酸致扭体反应分别减少23.3%(P<0.01)、39.7%(P<0.01)、68.5%(P<0.01)和52.1%(P<0.01),对电热板痛阈分别提高83.5%(P<0.01)、88.6%(P<0.01)、95.6%(P<0.01)和59.8%(P<0.01),对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度分别减少10.59%(P<0.01)、24.92%(P<0.01)、37.9%(P<0.01)和22.4%(P<0.01),对蛋清致小鼠足趾肿胀度分别减少17.6%(P>0.05)、29.4%(P<0.05)、38.2%(P<0.01)和32.4%(P<0.01);正常小鼠耳廓细动脉管径分别扩张2.1%(P>0.05)、9.0%(P<0.05)、14.5%(P<0.01)和23.3%(P<0.01),细静脉管径分别扩张3.0%(P>0.05)、6.5%(P<0.01)、11.7%(P<0.01)和18.2%(P<0.01),耳廓毛细血管开放数目分别增加10.8%(P<0.05)、17.0%(P<0.01)、22.7%(P<0.01)和32.1%(P<0.01);注射肾上腺素血瘀小鼠的耳廓细动脉管径分别扩张9.1%(P<0.01)、18.4%(P<0.01)、22.8%(P<0.01)和30.6%(P<0.01),细静脉管径分别扩张5.1%(P<0.01)、7.6%(P<0.01)、8.6%(P<0.01)和10.7%(P<0.01),耳廓毛细血管开放数目分别增加7.8%(P<0.01)、18.6%(P<0.01)、24.0%(P<0.01)和28.4(P<0.01)%。在试验四,制备正常和类风湿性关节炎小鼠脾细胞滤液培养,分别分为5个处理组,即生理盐水组、低剂量CSE组(2.5ppm/孔)、中剂量CSE组(5ppm/孔)、高剂量CSE组(10ppm/孔)和麝香组(5ppm/孔)组,在正常小鼠细胞,与生理盐水组比,脾脏淋巴细胞的增殖率(OD570)分别增加7.6%(P<0.05)、23%(P<0.01)、65%(P<0.01),麝香组减少15%(P<0.01),在类风湿性关节炎小鼠细胞,与生理盐水组比,脾脏淋巴细胞的增殖率(OD570)分别减少24%(P<0.01)、50%(P<0.01)、67%(P<0.01)和18%(P<0.01)。在试验五,将佐剂性关节炎大鼠分为5组,即模型组、低剂量刺山柑提取物(CSE)组(1.25mg/10g体重/天)、中剂量CSE组(2.5mg/10g体重/天)、高剂量CSE组(5.0mg/10g体重/天)和阿司匹林(2.5mg/10g体重/天)组,结果表明,与模型组比,各组大鼠足趾的18小时肿胀度分别降低14%(P<0.01)、19%(P<0.01)、33%(P<0.01)和6.6%(P<0.05),5天肿胀度分别降低15%(P<0.01)、27%(P<0.01)、36%(P<0.01)和7.2%(P<0.05),病理评分如炎细胞浸润程度分别降低14%(P<0.01)、43%(P<0.01)、47%(P<0.01)和9.2%(P>0.05),足趾炎症组织PGE2含量(OD278)分别降低6%(P<0.05)、18%(P<0.01)、30%(P<0.01)和9%(P<0.05),血清中IL-1含量分别降低7.3%(P<0.05)、35%(P<0.01)、60%(P<0.01)和6.7%(P<0.05),IL-6分别降低13%(P<0.01)、38%(P<0.01)、46%(P<0.01)和5.6%(P>0.05),TNF-α分别降低1.0%(P>0.05)、4.2%(P<0.05)、18%(P<0.01)和-0.3%(P>0.05),血细胞沉降率分别降低4.6%(P<0.05)、12.5%(P<0.05)、16.8%(P<0.05)和7.8%(P<0.05),血清中类风湿因子浓度分别降低7.3%(P<0.05)、19%(P<0.01)、40%(P<0.01)和8.6%(P<0.01)。以上试验表明,刺山柑提取物具有抗炎镇痛、免疫调节和促进微循环的作用,且与剂量相关,但其促进微循环作用的程度,不及阿司匹林,然而,刺山柑提取物却有较好的抗肿胀作用,特别是对佐剂性关节炎大鼠,还能够较好的减轻滑膜组织的病理变化,降低病变组织或血液中的PGE2、 IL-1、IL-6、TNF-α和类风湿因子的浓度,和降低血细胞沉降率,因此对关节炎可能会有较好的治疗作用。
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