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目的:本项目通过深入、系统研究蠲痛饮对血管内皮生长因子(VEGF)的干预作用,从细胞分子水平上研究名老中医治疗妇科痛症、不孕症的学术理论,研究蠲痛饮对子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)的作用机理,旨在为中医药治疗EMS的辩病论治及机制探索提供可资借鉴的研究思路,为临床有效治疗EMS提供一个良好的切入点,为推广应用打下坚实的基础。 方法:将健康清洁级雌性SD大鼠72只,体重220-250g,随机抽取12只作为空白组,其余大鼠均进行造模,建模方法参照Jones[1]等建模方法,4周末经病理组织学检查证实异位内膜已成活。再将造模成功大鼠随机分为蠲痛饮高、中、低剂量组、丹那唑组、模型组。给予蠲痛饮治疗并与丹那唑为对照,给药12周以后,禁食12小时称重,经股静脉采血,离心后吸取上清液,-20℃低温冰箱中保存备用。运用酶联免疫吸附试验(EliSA)中的双抗体夹心法测定血清VEGF水平,从药物调控VEGF表达的影响进一步研究蠲痛饮对EMS的作用机制。 结果:1症状学观察:造模28天后,腹壁移植物体积增大,出现液体积聚,呈隆起透明的小囊状,被结缔组织或大网膜覆盖并有血管形成。切取移植物送检,证实移植物中有子宫内膜上皮细胞、腺体及间质的生长。以移植物体积>8mm3,并显示积液,病理学检查有子宫内膜组织生长为模型成功的判断标准。60只大鼠中50只符合上述标准,造模成功率83.33%。2运用酶联免疫吸附试验(EliSA)双抗体夹心法测定血清中VEGF水平:(1)空白组大鼠血清中 VEGF表达与各组模型大鼠血清中 VEGF水平比较,各组比较P<0.01,有极显著性差异。(2)模型组大鼠血清中VEGF水平与各组大鼠血清中VEGF水平比较,各组比较P<0.01,有极显著性差异。证明蠲痛饮和丹那唑对降低大鼠血清中 VEGF水平有一定的作用。(3)蠲痛饮低剂量组中 VEGF水平与各组大鼠血清中VEGF水平比较:各组比较P<0.01,有极显著性差异。证明蠲痛饮中剂量、高剂量和丹那唑组对降低大鼠血清中 VEGF水平比蠲痛饮低剂量组好。(4)蠲痛饮中剂量组中 VEGF水平与各组大鼠血清中 VEGF水平比较:①蠲痛饮中剂量组中VEGF水平与蠲痛饮高剂量组比较(P=0.000),P<0.01,有极显著性差异,证明蠲痛饮高剂量组对降低大鼠血清中VEGF水平比蠲痛饮中剂量组好,②蠲痛饮中剂量组中 VEGF水平与丹那唑组比较(P=0.110),P>0.05,无显著性差异,证明蠲痛饮中剂量组对降低大鼠血清中VEGF水平与丹那唑组相当。(5)蠲痛饮高剂量组中VEGF水平与丹那唑组比较:(P=0.015);P<0.05,有显著性差异,证明蠲痛饮高剂量组对降低大鼠血清中VEGF水平比丹那唑组好。 结论:1:蠲痛饮可抑制 EMS大鼠异位内膜血管生成,降低血清中 VEGF含量。2:蠲痛饮低剂量组对降低大鼠血清中 VEGF水平有一定的作用,但是它的疗效在同等时间内没有中剂量、高剂量与丹那唑组好。3:蠲痛饮中剂量组与丹那唑组对降低大鼠血清中 VEGF水平的作用相当(等时间内),但是丹那唑组较好一些。4:蠲痛饮高剂量组的疗效最好,对降低大鼠血清中VEGF水平的作用最强(等时间内),与丹那唑组比较,其疗效好于丹那唑组。