芦丁在脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠体内抗炎作用的PK-PD模型研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:liongliong467
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近年来随着养殖业的迅速发展,炎症疾病的发生率越来越高,如传染性疾病、寄生虫、内外科疾病都可以引发炎症病变。急性炎症不仅会影响畜禽的健康,甚至会危及生命,影响畜牧生产,造成经济损失。芦丁是一种具有抗氧化、抗炎、抗病毒等多种药理活性的黄酮类化合物,然而因为其溶解性差、在体内吸收较慢等缺点,使其在兽医临床应用中具有较大的局限性。本试验运用药代动力学与药效动力学(PK-PD)模型研究芦丁在体内的代谢动力学特征与对急性肺损伤炎症的治疗作用之间的相关性。本研究采用脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤小鼠模型,连续灌胃给予芦丁(200mg/kg/d)5天,分别于给药后第2、3、4、5、6天处死小鼠,剖取肺组织,其中一部分肺组织用于计算肺湿干重比,另一部分肺组织用于测定NO含量和蛋白表达水平;采用Griess法和免疫蛋白印迹法分别检测NO含量和炎症信号通路中TLR4、TRAF6、IκB、P-IκB蛋白水平变化。试验结果表明芦丁能够明显抑制炎症介质(NO)的合成,直接发挥抗炎保护作用,同时能够抑制TLR4、TRAF6蛋白水平表达以及抑制IκB的磷酸化,发挥抗炎作用。本研究以木犀草素为内标,建立高效液相色谱方法检测血浆中芦丁需的浓度。建立小鼠急性肺损伤模型后,灌胃给予芦丁(200 mg/kg/d)连续5天,分别于给药后第1、2、3、4天和第五天给药后3、6、12、18、21、24、27、30、36、48、60、72 h经眼丛后静脉取血,用上述建立的高效液相色谱方法检测芦丁的血药浓度,运用Win Nonlin软件进行芦丁的药动学模型拟合,拟合出芦丁的药时曲线,并计算药动学参数。芦丁在脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠体内的吸收符合一室模型,T1/2α=9.755 h、T1/2β=19.442 h、Tmax=24.00 h、Cmax=22.651μg/m L、AUC=518.577μg/m L·h。建立PK-PD结合模型,以效应室联接的一室模型-Sigmod Emax模型拟合芦丁最佳给药时间;同时通过结合模型揭示芦丁对NO含量和TLR4、TRAF6、IκB、P-IκB的蛋白水平表达等效应指标的影响,并描述上述指标变化与芦丁的药代动力学特征的关系。本研究以脂多糖诱导急性肺损伤为模型,分别研究芦丁在急性肺损伤小鼠体内的药代动力学及药效动力学过程,并在此基础上建立芦丁治疗急性肺损伤的PK-PD结合模型,通过量化分析芦丁在脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠体内的药动学与药效学的相关性,为兽医临床新型抗炎药物的研究和开发提供理论基础。
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