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【目的】通过建立尿激酶持续低温灌注大鼠热缺血供肾肾移植模型,检测移植鼠血清肌酐值、尿量、移植肾主要组织相容性抗原Ⅱ类分子(MHC-Ⅱ类分子)表达水平及观察大鼠存活时间,初步探讨尿激酶持续低温灌注对移植肾肾功能及早期预防急性排斥反应是否产生影响,为今后对DCD供肾采用合理的处理方式提供思路和依据。【方法】选取80只已成年的健康的雄性SD大鼠,大小12-14周龄,重达250±50g,通过完全随机设计,采用随机数字表法,将实验对象划分为实验组与对照组两个组,每组40只。再于各组组内将大鼠随机分为供体与受体两类,每类20只。实验组为尿激酶持续低温灌注组(尿激酶+高渗枸橼酸盐嘌呤溶液),对照组为普通持续低温灌注组(生理盐水+高渗枸橼酸盐嘌呤溶液)。将热缺血45min肾脏灌注2小时后移植到受体SD大鼠颈部,同时去除受体原位双肾。比较实验组、对照组两组受体大鼠术后48小时血清肌酐水平及总尿量情况,观察术后第三天时移植肾组织病理(HE染色)和免疫组化检测移植肾组织MHC-Ⅱ类分子表达情况,并对移植肾MHC-Ⅱ类分子表达进行RT-PCR半定量分析,记录术后受鼠存活时间。【结果】1、血肌酐及尿量检测尾静脉抽血检测肌酐值:实验组术后48小时的肌酐值(220.72±10.48)umol/L明显低于对照组(235.73±12.21)umol/L,P<0.05,差异有统计学意义。术后记录尿量值:实验组术后48小时总尿量为(16.71±1.07)ml,对照组受鼠存活时间为(16.02±0.90)ml,P<0.05,差异有统计学意义。2、移植肾组织病理(HE染色)移植肾病理切片HE染色检查,根据Banff 2013移植肾病理分级结果:实验组病理分级为ⅡA-ⅡB级,可见肾间质有少量炎症细胞浸润,部分肾小球毛细血管内存在少许微血栓;对照组病理分级为ⅡB-ⅡI级,肾小球毛细血管内可见大面积血栓形成,肾间质及肾小管大面积炎症细胞浸润,提示移植肾排斥反应强烈。3、移植肾组织免疫组化检测MHC-Ⅱ类分子表达情况对照组及实验组移植肾组织均存在不同程度的染色。根据图像分析系统定量测定后发现:在移植术后第三天实验组MHC-Ⅱ阳性区域面积比均值为(9.87±0.81)%,相对于对照组阳性区域(11.65±1.17)%明显偏少,P<0.05,差异具有显著性,有统计学意义。4、移植肾MHC-Ⅱ类分子表达的RT-PCR半定量分析实验组和对照组移植肾组织MHC-Ⅱ类分子均有不同的表达量,对照组表达量均值为(0.215±0.004)明显高于实验组(0.176±0.003),P<0.05,差异具有显著性,有统计学意义。5、术后受体大鼠存活时间实验组受鼠存活时间为(8.30±0.39)天,对照组受鼠存活时间为(6.80±0.41)天,实验组存活时间明显长于对照组,P=0.02<0.05,差异具有显著性,有统计学意义。【结论】添加尿激酶的器官保存液持续低温灌注缺血供肾能有效减轻其缺血再灌注损伤,一定程度上减少移植肾MHC-Ⅱ类分子的表达,改善移植肾肾功能,预防急性排斥反应的发生。