【摘 要】
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根结线虫是为植物寄生性线虫,其寄主范围广,被认为是世界范围内最重要的病原物之一;生防细菌能够有效地防治根结线虫,是非常有潜力的生物防治手段。本文主要包含根结线虫的分子鉴定生防细菌的筛选、鉴定、以及对根结线虫作用机理的初步研究等方面的内容。本研究利用特异性引物鉴定了来自湖北麻城市的81条根结线虫白雌虫,确定南方根结线虫为此次鉴定线虫中的优势种群;从湖南娄底、安徽合肥、湖北当阳、西藏等地区采集土样,获
【基金项目】
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公益性行业（农业）科研专项经费项目201103018；
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根结线虫是为植物寄生性线虫,其寄主范围广,被认为是世界范围内最重要的病原物之一;生防细菌能够有效地防治根结线虫,是非常有潜力的生物防治手段。本文主要包含根结线虫的分子鉴定生防细菌的筛选、鉴定、以及对根结线虫作用机理的初步研究等方面的内容。本研究利用特异性引物鉴定了来自湖北麻城市的81条根结线虫白雌虫,确定南方根结线虫为此次鉴定线虫中的优势种群;从湖南娄底、安徽合肥、湖北当阳、西藏等地区采集土样,获得样品9份,分离得到的细菌210株,其中通过对拟松材线虫室内离体杀线虫活性的测定初步筛选出了具有高效杀线虫活性的细菌30株;这30株细菌通过对根结线虫生测,最终筛选出线虫二龄幼虫死亡率较高的6株细菌,分别为AH-5、AH-6、DY-5、DY-17、XZ-O2*,XZ-O9、DY-17,这些菌株在24h时对根结线虫二龄幼虫的致死率均在75%-100%之间。将选择的细菌进行温室盆栽试验,结合40天与60天两个阶段的盆栽试验结果显示,对根结线虫有较好防治效果,且对植物生长有促进作用的细菌有3株,分别为AH-5、AH-6、XZ-O2*。这三株细菌与未处理的对照相比,豌豆根组织中的根结线虫卵与二龄幼虫数量明显下降,其相对防效均在50%-80%之间。基于对细菌16S rDNA序列的分析与形态学观察相结合的方法鉴定这6个细菌菌株,并检测了它们的生理生化特征。结果表明AH-5、DY-17为木糖氧化无色杆菌,AH-6为巨大芽孢杆菌,DY-5为枯草芽孢杆菌,XZ-O2*为萎缩芽孢杆菌,XZ-O9为甲基营养型芽孢杆菌。对筛选出的6株细菌菌株杀线虫机理进行了初步研究,通过生测试验证明:（1）在6株细菌中除了DY-17以外,其余5株细菌均可以抑制根结线虫卵的孵化;（2）AH-6、XZ-O2*、DY-5、XZ-O9可以产生具有杀线活性挥发性物质;（3）AH-6、XZ-O2*、DY-17可以产生具有杀线活性的蛋白类物质;（4）所有的菌株产生的杀线物质均不耐酸碱。
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