CD19~+CD5~+IL-10~+B细胞在系统性红斑狼疮患者中的表达及发病机制的影响

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【背景】系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是一种由多因素参与的以多脏器受累为特征的自身免疫性疾病,免疫功能紊乱贯穿其整个发病过程。到目前为止,免疫异常的机制仍未阐明。以往的研究认为,B细胞在自身免疫病的发生、发展中扮演致病性角色。新近研究显示,B细胞也参与机体免疫应答的调节,在自身免疫病过程中起免疫抑制作用,这种具有保护作用的抑制免疫应答炎性反应的B细胞亚群被命名为调节性B细胞(regulatory B cell,Bregs)。在此之前,调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)的负向调节功能一直是人们的研究热点,但是对于机体免疫调节所必不可少的B细胞,我们认为B细胞发挥正向免疫调节功能,但是近来人们逐渐发现B细胞与调节性T细胞一样具有负向免疫调节功能。本研究将对系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征患者及正常人外周血淋巴细胞进行体外刺激、培养,分析并比较系统性红斑狼疮患者与类风湿关节炎、干燥综合征患者及正常人CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达差异,并探讨CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达与系统性红斑狼疮的相关性。【目的】(1)比较SLE患者与RA患者、SS患者及正常对照组CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达,初步探讨CD19+CD5+IL-10+B在自身免疫病中的作用;(2)比较活动期SLE患者与非活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达,分析CD19+CD5+IL-10+B细胞在不同活动期SLE患者中的变化;(3) CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLE疾病活动的相关性分析;(4)比较VCR联合CTX治疗前后SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达差异。【方法】选取2011年6月至2013年1月在山西医科大学第二医院风湿科就诊SLE患者50例,诊断均符合1997年修订的美国风湿病学会(American College ofRheumatology, ACR)分类标准。签署知情同意书。收集SLE患者一般情况和临床资料,根据SLE疾病活动指数(systemic lupus erythematosus disease activityindex,SLEDAI)积分评估疾病的活动性。同时选取RA活动期患者、SS患者及正常对照组各10名,均不符合SLE诊断标准;试验在获得研究对象知情同意后,抽取外周静脉血。流式细胞术检测入组的SLE患者及正常对照者外周血CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞的百分数,分析其比例及变化。采用SPSS17.0统计软件分析。【结果】1. SLE患者、RA患者、SS患者及正常对照组CD19+CD5+IL-10+B细胞及其亚型的比例(1)流式细胞术检测CD19+CD5+B淋巴细胞比例显示SLE患者与正常人分别为(5.99±2.65)%和(19.08±2.92)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);SLE患者与RA患者分别为(5.99±2.65)%和(18.49±6.74)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002);SLE患者与SS患者分别为(5.99±2.65)%和(17.51±2.37)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。(2)流式细胞术检测CD19+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE患者与正常人分别为(3.96±2.14)%和(9.07±2.37)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.01);SLE患者与RA患者分别为(3.96±2.14)%和(11.05±4.81)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002);SLE患者与SS患者分别为(3.96±2.14)%和(7.23±2.19)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。(3)流式细胞术检测CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE患者与正常人分别为(2.38±1.51)%和(7.86±1.82)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.022);SLE患者与RA患者分别为(2.38±1.51)%和(8.23±4.86)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002);SLE患者与SS患者分别为(2.38±1.51)%和(6.29±1.94)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。2. SLE活动期患者与非活动期患者CD19+CD5+IL-10+B细胞及其亚型的比例(1)流式细胞术检测CD19+CD5+B淋巴细胞比例显示SLE活动期患者与非活动期患者分别为(3.99±1.39)%和(7.71±2.15)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。(2)流式细胞术检测CD19+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE活动期患者与非活动期患者分别为(2.71±2.14)%和(5.22±2.12)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。(3)流式细胞术检测CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE活动期患者与非活动期患者分别为(1.76±1.08)%和(3.28±1.66)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。3. SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLEDAI评分、ESR及补体的相关性活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.645,P<0.01);与ESR呈负相关(r=-0.526,P<0.05);与补体C3呈正相关(r=0.435,P=0.03);非活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.627,P=0.001);与ESR呈负相关(r=-0.497,P=0.001);与补体C3呈正相关(r=0.922,P=0.001)。4. VCR联合CTX治疗前后SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞及其亚型的变化(1)流式细胞术检测CD19+CD5+B淋巴细胞比例显示VCR联合CTX治疗前后分别为(3.87±1.67)%和(7.63±1.67)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。(2)流式细胞术检测CD19+IL-10+B淋巴细胞比例显示VCR联合CTX治疗前后分别为(2.19±1.07)%和(4.47±1.63)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。(3)流式细胞术检测CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞比例显示VCR联合CTX治疗前后分别为(0.96±0.47)%和(2.64±1.01)%,两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。【结论】1. SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞明显低于RA、SS患者及正常对照组,提示CD19+CD5+IL-10+B细胞在SLE发病中起着重要作用。2. SLE活动期患者CD19+CD5+IL-10+B细胞明显低于非活动期患者,提示随着CD19+CD5+IL-10+B细胞的升高,SLE患者疾病活动度明显下降。3.活动期与非活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞均与SLEDAI评分、ESR呈正相关,与补体C3呈负相关,提示CD19+CD5+IL-10+B细胞的变化影响疾病活动。4.VCR联合CTX治疗后,SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞明显升高,提示VCR联合CTX可以调节CD19+CD5+IL-10+B细胞,改善病情。
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