乙型脑炎病毒对猪外周血淋巴细胞因子mRNA转录时相影响的研究

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猪乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus, JEV)是母猪繁殖性能障碍的重要病原体,JEV又经常同许多病毒交叉感染对养猪生产带来好多弊端,所以加强对JEV的研究工作,意义显得十分重要。1我们利用实时定量PCR分别对JEV感染外周血单层淋巴细胞JEV RNA及Bcl-2、Bcl-xl、FasL、p53和PBR五种凋亡相关细胞因子含量进行检测,结果显示:在感染1小时,病毒DNA表达量开始出现,病毒可以测出,在感染后期72小时能达到最大值,此时DAN的相对表达量达到16倍左右;Bcl-2感染1小时后开始增殖,在3小时大量表达,随后降低。FasL感染72小时后增加到峰值Bcl-xl感染1小时、12小时、24小时、48小时后表达量降低,3小时、72小时大量表达分别为对照组的4.8倍、560倍;P53感染1小时、3小时、12小时、24小时、48小时后表达量不明显,72小时后表达量达到最大值为对照组15倍;PBR感染1小时、3小时、12小时、72小时后大量表达分别为对照组的1.5倍、7.7倍、9倍、83倍,24小时和48小时表达量降低。2我们分别对JEV感染淋巴单层细胞后IL-8、12p40、12P35及IL-17、IL-18相关细胞因子水平进行实时定量PCR检测,结果发现IL-8感染1小时、3小时、24小时、72小时后大量表达,分别是对照组的1.7倍、10倍、3.2倍、2.8倍,12小时、48表小时达量降低;12p40感染1小时、3小时、12小时、24小时后分别为对照组的1.6倍、5.7倍、5.3倍和1.9倍,接着在48小时表达量降低,72小时甚至不表达;12p35感染1小时开始表达,3小时表达降低,12小时、24小时表达量都增加,48小时表达量达到峰值,约73倍左右,72小时表达量降低;IL-17感染1小时、3小时、12小时后与对照组相比表达量增加的幅度不明显,24小时、72小时甚至不表达,48小时表达量大量增殖;IL-18感染1小时开始表达,3小时大量表达,12小时、24小时、48表小时达量增高趋势,在72小时表达量达到峰值,约为7.8倍。3我们利用实时定量PCR分别对JEV感染淋巴单层细胞后MIP-1α、TGF-β1、PGK1分泌水平进行检测,结果发现MIP-1α感染1小时后开始表达,3小时大量表达,12小时、24小时、48小时都不表达,72小时表达值达到峰值;TGF-1p感染1小时、3小时、72小时后与对照组相比表达量有增殖趋势,分别为1.1倍、1.09倍、3.6倍,12小时、24小时、48小时后与对照组相比表达量都降低;PGK1感染1小时、12小时、24小时后与对照组相比表达量不显著,在3小时、48小时表达量降低,72小时大量表达。总之,对JEV感染猪外周血淋巴单层细胞部分因子转录时相进行研究,目的就是掌握细胞因子的免疫学作用原理及JEV的分子作用机制,为预防和治疗JEV提供理论基础。
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