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目的: 观察自立温肾阳之方天阳丸对晚期糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)模型大鼠的空腹血糖、糖化血红蛋白、肌酐、尿素氮、尿蛋白及其肾脏病理变化的影响,探讨其药效学作用。基于“方证相应”的理念,与自立益肾阴之方地子丸对照研究,以期为DN晚期阶段中医学之阴阳属性提供探索性参佐。 方法: 雄性SD大鼠60只,将大鼠随机分为空白组和造模组,空白组用普通饲料喂养,其余各组均用高脂乳喂养10周后联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(Streptozocin,STZ),测量空腹血糖值大于16.7mmol/L,确定为糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)模型。根据空腹血糖值将造模组大鼠分为模型组、阳性药组、地子丸组、天阳丸组。6周后,使用代谢笼收集大鼠24小时尿液,测量大鼠尿微量白蛋白在30-300mg/24h之间,认为DN模型复制成功。此时,阳性药组、地子丸组及天阳组分别给予相应药物经口灌胃干预,持续给药8周。实验期间自由饮水,不使用胰岛素和其它降糖药。实验结束后收集大鼠24小时尿液,用以测量大鼠的24小时尿蛋白。行腹主动脉穿刺取血,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimm imosorbent assay,ELISA)分别检测各组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、尿蛋白、肌酐和尿素氮等指标。各组大鼠处死后,将肾脏以4%多聚甲醛溶液固定,采用HE染色方法,观察各组大鼠肾脏的病理变化情况,其余肾组织储存于液氮中备用。 结果 1.对DN大鼠一般情况的影响:与空白组相比,模型组大鼠出现活动度减少,反应迟钝,精神萎靡,体重逐渐下降,皮毛枯槁无光泽,弓背耸毛,骨骼凸出等症状。阳性药组、地子丸组的大鼠整体状态整体优于模型组,天阳丸组大鼠与其他药物治疗组大鼠相比一般情况最佳。 2.对各组大鼠肾脏指数的影响:与空白组相比,模型组大鼠的肾脏指数升高明显;与模型组比较,天阳丸组、阳性药组、地子丸组的DN大鼠肾脏指数均有所降低,且天阳丸组大鼠肾脏指数降低明显,差异具有统计学意义。 3.对各组大鼠空腹血糖的影响:与空白组相比,其余各组大鼠的空腹血糖值均明显升高;与模型组相比较,各药物治疗组空腹血糖值均降低,其中天阳丸组空腹血糖值最低,与阳性药组及地子丸组相比较,差异均具有统计学意义。 4.对各组DN大鼠糖化血红蛋白含量的影响:与空白组相比,其余各组大鼠的大鼠糖化血红蛋白含量均明显升高,差异具有统计学意义;与模型组相比较,各药物治疗组的糖化血红蛋白含量比较无统计学意义。 5.对各组DN大鼠空腹胰岛素水平的影响:与空白组相比,其余各组大鼠的空腹胰岛素水平均明显升高,差异具有统计学意义;与模型组相比较,阳性药组、地子丸组及天阳丸组空腹胰岛素水平均降低,差异具有统计学意义。 6.对各组大鼠肌酐和尿素氮水平的影响:与空白组相比,其余各组大鼠的肌酐与尿素氨水平均明显升高;与模型组比较,阳性药组、天阳丸组大鼠肌酐与尿素氮水平均显著降低;与地子丸组比较,天阳丸组、阳性药组大鼠肌酐与尿素氮水平均降低,且天阳丸组大鼠肌酐与尿素氮的含量最低,差异均具有统计学意义。 7.对各组大鼠尿蛋白含量的影响:与空白组相比,其余各组大鼠尿蛋白含量均明显升高;与模型组相比,各药物治疗组的尿蛋白含量均降低;与地子丸组相比,天阳丸组与阳性药组大鼠尿蛋白含量降低较为显著,且阳性药组大鼠尿蛋白含量最低,差异均具有统计学意义。 8.对各组大鼠肾脏组织病理学变化:HE染色后光镜下观察,模型组可见肾脏体积增大,肾小球径增大,部分肾小球系膜区增宽,系膜基质轻度结节样增生,肾小管扩张明显。经过药物治疗后,各组大鼠的肾脏病理变化与模型组相比明显减轻。其中,天阳丸组大鼠的肾小球及肾小管与空白组相比略显增大,而阳性药组与地子丸组大鼠的肾小球体积相差不明显。 结论: 1.天阳丸能够改善晚期DN模型大鼠的一般状态,降低相关的药效学指标,并有效的减少尿蛋白的排泄量、降低肾脏肥大指数,减轻肾小球的硬化程度,修复肾脏功能,对肾脏有一定的保护作用。 2.基于“以方测证”的理念,将天阳丸与地子丸进行比较,冀以为DN发展至晚期多伴有阴阳两虚之证提供现代实验研究探索数据参佐。