自体PRP、PDLSCs联合HA修复小型猪牙周骨组织缺损的实验研究

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目的:研究小型猪自体富血小板血浆、牙周膜干细胞联合羟基磷灰石修复牙周骨组织缺损的作用。方法:全麻下采集贵州小型猪静脉全血,二次离心法制备PRP,测定其中TGF-β1和PDGF-AB的含量。采用组织块法获得小型猪牙周膜干细胞(PDLSCs),用免疫荧光法检测STRO-1进行鉴定。取第3代小型猪PDLSCs接种在羟基磷灰石支架材料上并加入PRP复合培养,分别在第1、3、7天用扫描电镜观察细胞在羟基磷灰石上的生长情况。建立小型猪牙周骨缺损模型:以骨缺损部位加入移植材料的不同分组,A组,牙周骨缺损区植入PRP/PDLSCs/HA;B组,牙周骨缺损区植入单纯HA支架材料;C组,牙周骨缺损区不处理,直接缝合。术后4、8、12周处死动物,分别从大体、影像学、组织学方面进行观察。结果:原代培养的小型猪牙周膜干细胞生长良好,STRO-1免疫荧光染色阳性。扫描电镜观察结果表明,PDLSCs在羟基磷灰石上生长良好。实验组A组、B组在术后4、8、12周均有不同程度的骨组织再生,A组优于B组,而空白对照组只有少量成骨。结论:小型猪牙周膜干细胞可以在体外用组织块法成功的分离培养,并在羟基磷灰石支架材料上良好的生长,应用PRP作为内源性生长因子、PDLSCs作为种子细胞、HA作为支架材料联合构建的组织工程骨修复骨缺损的效果良好,为牙周骨组织修复和牙周组织工程研究提供了实验依据。
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