NO、右归丸对小鼠排卵与卵母细胞质量的影响及NOS在卵巢中的表达研究

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本试验以昆明白小鼠为研究对象,观察不同浓度NOS竞争性抑制剂L-NAME与NO供体SNP对小鼠排卵及卵母细胞成熟的影响,同时通过免疫组织化学的方法研究了eNOS、iNOS在小鼠卵巢中的表达差异及L-NAME对其表达的影响,以了解NO在卵泡发育及卵母细胞成熟过程中的作用。同时研究了中药名方右归丸对超排过程中卵母细胞质量的影响。1.试验一采用单独给18-21天未性成熟的小鼠腹腔注射不同剂量的L-NAME、SNP或联合注射L-NAME及SNP的方法,研究体内抑制NOS以及外源性NO对小鼠卵母细胞成熟和排卵的影响,以了解NO在卵母细胞成熟过程中的作用。结果表明:高剂量的L-NAME(50mg/kg、100mg/kg)对小鼠卵母细胞的第一极体排放有显著抑制作用(P<0.01),而SNP(1mg/kg、5mg/kg)处理组的小鼠排卵率则有显著的降低(P<0.01),两者联合注射(L-NAME 50mg/kg+SNP 5mg/kg)小鼠排卵率与对照组无显著差异,但第一极体排放率仍显著低于对照组。各组处理对卵母细胞的GVBD均没有影响。结论:合适的NO浓度在小鼠排卵和卵母细胞成熟过程中起着重要的作用,过高或过低的NO浓度都会对其排卵及卵母细胞的成熟造成影响。2.试验二以使用PMSG及hCG进行超数排卵处理的小鼠为试验材料,在hCG注射前后3h腹腔注射不同剂量的L-NAME。采用免疫组织化学的方法研究了在此过程iNOS、eNOS在小鼠卵巢中的表达差异,结果表明:iNOS、eNOS在小鼠卵巢中均有广泛的表达,但eNOS的表达与iNOS相比较强。其中iNOS在闭锁卵泡中表达量很少;hCG对iNOS在卵巢中的整体表达有明显的增强作用,5mg/kg L-NAME处理时其表达量明显减弱,而50mg/kg L-NAME处理时已经没有阳性表达。eNOS在未用激素处理时即有大量表达,而50mg/kg L-NAME处理时表达量明显减弱,100mg/kgL-NAME处理时只有少数原始卵泡及部分卵泡膜细胞尚有少量表达。3.试验三比较了右归丸、超排激素对小鼠排卵和卵母细胞质量的影响,并通过孤雌激活的方法比较了卵母细胞的发育质量,结果表明,右归丸能够与激素协同作用,显著提高卵母细胞的质量以及孤雌胚胎的早期发育能办(P<0.05)。
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