利用激活标签法筛选番茄突变体的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loughtjiang
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本研究以小型番茄(miniature Lycopersicon esculentum Mill.)Micro-Tom和M82为试材,建立了以子叶、下胚轴为外植体的稳定的再生体系。同时,通过根癌农杆菌介导法,建立了Micro-Tom和M82的遗传转化体系。结果表明:1. Micro-Tom以子叶、下胚轴为外植体时,诱导愈伤组织和芽分化的适宜培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L,芽分化率高达92%。2. M82以子叶、下胚轴为外植体时,诱导愈伤组织和芽分化的适宜培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.4mg/L,芽分化率达70%左右。3.两种试材适宜的生根培养基均为MS+NAA0.1mg/L,生根率达80.0%以上。4.乙酰丁香酮能大大提高根癌农杆菌转化番茄的效率,当AS(180μM/L)时,本转化的芽分化率为52.8%;OD600=0.14是本转化的最佳菌液浓度,最佳侵染时间为3min。5.两种试材的子叶外植体与农杆菌共培养后,经过抗性芽的诱导,根的再生,都获得了紫色抗性苗。抗性植株经PCR检测、Southern杂交检测、Lc基因的表观表达证明外源基因已经分别整合到Micro-Tom和M82基因组中,且得以表达。
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