背景 胰腺癌是一种临床起病隐匿、发展迅速和预后不良的消化道恶性肿瘤，其5年生存率不到5％。目前，化疗仍是胰腺癌辅助治疗的重要手段之一[1]，但是静脉化疗全身副反应较重且总体疗效不佳，有统计显示：有效率仅为20％左右[2]。近年来随着介入放射学的发展，经胰腺供血动脉局部灌注化疗已经应用于临床[3－6]。其由于能够提高局部的药物浓度[7－9]，而使得其它器官的药物浓度相对减少从而可在一定程度上提高患者生活质量，降低化疗反应及延长生存期。对于胰腺癌药物浓度与细胞的生长抑制作用尚未见文献报道。实体瘤免疫导向治疗取得了飞速发展，单抗药物的研究和开发成为生物技术药物的新热点。本文研究不同浓度的化疗药物及p21蛋白单克隆抗体对胰腺癌细胞株Aspc－1、Bxpc－3的生长抑制作用，以及分析5－氟尿嘧啶、顺铂和表阿霉素对胰腺癌细胞(Aspc－1)的相互作用，为临床胰腺癌化疗及生物导向治疗提供理论指导。 目的 1．探讨5-氟尿嘧啶、表阿霉素、顺铂、丝裂霉素不同浓度、作用时间及联合用药对胰腺癌(Aspc-1和Bxpc-3)细胞株生长抑制作用的影响。 2．研究p21蛋白单克隆抗体单用或与化疗药物联合应用时对胰腺癌细胞株Aspc-1、Bxpc-3的生长抑制作用和诱导调亡效应。 3．分析5-氟尿嘧啶、顺铂和表阿霉素对胰腺癌细胞Aspc-1的相互作南京医科大学硕士学位论文材料和方法单独或联合使用(三药合用SFU+E一ADM+DDP、SFU+E一ADM+MMC)不同浓度的4种化疗药物:5一FU、MMC、DDP及E一ADM(浓度分为dl、dZ、d3、d4)，分别作用24、48和72，J、时后，用MTT比色法检坝，!药物对两株细胞的生长抑制作用，并对计算出的每组细胞生长抑制率行析因方差分析。2.采用MMT比色法和流式细胞仪(FCM)观察单独应用p21蛋白单克隆 抗体及和四种常用化疗药物合用对细胞株ASpc一1、BXp。一3的生长 抑制作用和诱导调亡效应。3.采用MTT测定5一FU、DDP和E一ADM单用及两两合用时对细胞株AsPc 一1的抑制作用，并应用中效原理判定药物合用的效果。今士甲二曰刁又单独和联合用药时两株细胞对不同药物的敏感性存在显著性差异(单独用药F=111.OP<0.001、联合用药F=4.SP=0.034)。无论是单用药还是联合用药两株细胞的生长抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而显著上升(浓度F一17018 P<O.001)(时间F一8461P<o.001)。另外，两株细胞对相同药物的敏感性也具有显著性差异(单用药物F=470P<0.001、联合用药F=136P<0.001)。2.p21蛋白单克隆抗体能抑制胰腺癌细胞株AsPc一1、BxPc一3的生长， 与化疗药物联合应用能增强药物对细胞生长抑制作用。流式细胞仪检 测显示其主要是通过诱导细胞调亡从而抑制细胞的生长。3.5一FU和DDP合用时小剂量时产生协同作用(CI<1)，大剂量时产生拮 抗作用(CI>)。5一Fu和E一ADM、DDP和E一ADM合用时产生轻度拮抗 作用(Cl>1)。南京医科大学硕士学位论文结论 胰腺癌细胞株Aspc一1和BxPc一3的生长抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而显著上升，通过动脉灌注或保留导管持续灌注以提高化疗药物局部浓度及延长药物作用时间能够改善胰腺癌的化疗效果。胰腺癌存在K一ras基因表达产物p21蛋白高表达，p21单抗具有直接抗胰腺癌的作用，与化疗药物联合使用可提高疗效。推测p21单抗可作为一种较理想的放免定位和免疫治疗载体。在单克隆抗体发展的基础上可能建立起一种有效实用的治疗中晚期胰腺癌及其它肿瘤的新方法。对细胞株ASpC一1，5一FU和DDP合用时的相互作用与药物浓度有关，但在大多数浓度下表现为拮抗作用，5一FU和E一ADM、DDP和E一ADM合用时在不同浓度均表现为轻度拮抗作用。这可能是胰腺癌联合化疗总体疗效欠佳的原因之一。