白血病患者PBMC中αβT细胞TCR CDR3谱系特征初步分析

来源 :遵义医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xjzsdy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:初步分析白血病患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)中T淋巴细胞受体(Tcell receptor,TCR)a链、β链各家族互补决定区3(complementarity determining regions3,CDR3)谱系特征和克隆增殖性(溶解曲线单峰)家族的分子特征。   方法:(1)采集4例健康志愿者和15例白血病患者外周血,分离PBMC;(2)提取PBMC中总RNA,并以总RNA为模板合成cDNA;(3)分别以人34个TCR a链和26个TCRβ链胚系可变区基因家族-TRAV(TCRa chain variable gene,TRAV)和TRBV(TCRβ chain variable gene,TRBV)设计上游引物,以共同的TCR a链和TCRβ链胚系恒定区基因家族-TRAC(TCR a chainconstant gene,TRAC)和TRBC(TCRβ chain constant gene,TRBC)设计下游引物;用荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)扩增TCR a链34个家族和β链26个家族的CDR3区;(4)用FQ-PCR溶解曲线法分析TCR a链、β链各家族CDR3区的单/寡/多克隆性增殖情况;各家族FQ-PCR产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳作初步分析;(5)挑选单/寡克隆增殖性(溶解曲线单峰)家族进行普通PCR;PCR产物回收后测序,分析基因序列、氨基酸序列。   结果:(1)4例健康志愿者34个TRAV家族和26个TRBV家族CDR3区FQ-PCR溶解曲图,各家族均显示为多个峰型图;各家族FQ-PCR产物1.5%琼脂糖凝胶电泳,均于预测大小位置显示条带;(2)白血病患者TCR34个TRAV家族和26个TRBV家族CDR3区的FQ-PCR溶解曲线图,多数家族显示为多峰图,部分家族显示单峰图,部分家族显示低峰/无峰图;各家族FQ-PCR产物1.5%琼脂糖凝胶电泳,各家族在预测大小位置显示条带;白血病患者TRAV和TRBV家族CDR3区FQ-PCR溶解曲线图单峰家族基因序列、氨基酸序列不同。   结论:白血病患者外周血中TRAV和TRBV家族CDR3区FQ-PCR溶解曲线图,存在数量不等的异常峰型(表现为单峰、寡峰、低/无峰);白血病患者外周血TRAV和TRBV家族存在克隆性增殖;各增殖家族的基因序列、氨基酸序列不同;是进一步研究白血病外周血中T淋巴细胞肿瘤性质和T淋巴细胞肿瘤抗肿瘤机制的基础。
其他文献
债务加入制度作为一项民事法律制度首次在《民法典》中被加以确认,本文拟围绕债务加入前提、债务加入要件、债务加入效力三个方面论述《民法典》对该制度的规定,并从法律性文
坚持全面监控、重点稽查、协同高效、持续提升的原则,以实现“经营风险全面防范、工作质量可控在控、管理水平持续改进”为理念,充分发挥营销稽查作用,提高营销稽查监控异常
在建立多元化的纠纷解决机制的大背景下,行政裁决制度具有高效率、低成本等优势,利用行政机关的专业优势有效解决民事争议,缓解司法机关的压力,其制度价值不容忽视.本文拟通
长期以来,派驻检察都是各级检察机关针对监狱和看守所所采取的主要监督检察模式,并在检察机关刑事执行监督职能方面发挥出了重要的作用.随着新时期刑事司法工作的发展,作为检
<正>全球化的进程与中国改革的深入使得国际国内形势日益复杂。为积极应对业已或可能出现的危机,抢占舆论引导的制高点,经受了2008年频发的重大突发事件洗礼的中国电视,带着
我县位于山西省东南部,属于半湿润易旱农区,年平均降雨556毫米.春季干燥多风,冬季雨雪稀少,雨量多集中于夏秋两季。农田灌溉面积甚少,81%以上为早地。为了解决旱地农业增产问
公安院校在我国高等教育创造性转型的新时期提出了“培养实战能力强的应用型公安专门人才”的目标.为了顺应这一目标,公安法学课程就势必需要做出改革,以突出公安教育的实践
法学专业课程思政建设是通过课堂教学、教材等,根据哲学上普遍联系的原则,以法学知识为主,以思政知识为辅的融合、提升教学效果的高等教育实践活动.践行法学专业课程思政理念
试验证明:拌种、浸种、叶喷三种施用稀土的方法都可以使甜菜的块根产量、含糖率增加。三种方法平均亩增广8.8%,增糖1.0度。增加产糖量15.5%。平均亩增加收入50.33元。三种施
行政法和行政诉讼法这门课程相比于其他的法学课程,其内容更加复杂抽象,很多概念对于学生而言也要相对抽象较难理解,这两门课程的理论性和实践性也较强,传统教育模式下的灌输